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GST亲和层析问题 已有1人参与
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求各位高手指教! 我最近用GST亲和层析柱纯化一批可溶性表达的蛋白,用~20ml的10mM GSH,50mM Tris(PH 8.0)的洗脱液分10次洗脱,洗脱后的蛋白跑AKTA纯化,量特别少,盐酸胍处理GST柱时发现有大量蛋白被洗下来,想问一下,与谷胱甘肽有亲和作用的蛋白特征是什么,有没有可能我的蛋白沉淀在柱子上?对于这种情况有什么好的解决办法? |
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hc-material
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2楼2016-07-01 11:47:52
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谢谢!我之前试过将洗脱液的PH降为6.9,这个PH跟我纯化蛋白的缓冲液的PH值一样,您说的将PH降到5.0是有什么道理?另外,我今天准备加大GSH的量到50mM试一下,非常感谢您的帮助! 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-07-01 14:36:50
凯伦爱佳佳
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