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GST亲和层析问题 已有1人参与
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求各位高手指教！ 我最近用GST亲和层析柱纯化一批可溶性表达的蛋白，用~20ml的10mM GSH，50mM Tris（PH 8.0）的洗脱液分10次洗脱，洗脱后的蛋白跑AKTA纯化，量特别少，盐酸胍处理GST柱时发现有大量蛋白被洗下来，想问一下，与谷胱甘肽有亲和作用的蛋白特征是什么，有没有可能我的蛋白沉淀在柱子上？对于这种情况有什么好的解决办法？ |
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hc-material
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2楼2016-07-01 11:47:52
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谢谢！我之前试过将洗脱液的PH降为6.9，这个PH跟我纯化蛋白的缓冲液的PH值一样，您说的将PH降到5.0是有什么道理？另外，我今天准备加大GSH的量到50mM试一下，非常感谢您的帮助！ 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-07-01 14:36:50
凯伦爱佳佳
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4楼2016-07-04 01:09:59
5楼2016-07-04 14:53:47