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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量PCR Ct值
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L笨小孩

铜虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR Ct值 已有7人参与

我做了相同的稀释倍数后发现目的基因的Ct值好多都是三十多，而内参基因的都是二十多，请问这样的数据能用吗？
做荧光定量PCR，目的基因和内参基因的模板稀释倍数一定要一样吗？不一样的话，比如目的基因模板稀释10倍，内参不稀释，这样可行吗？
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1楼 2016-06-24 19:58:33
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意萧02

木虫 (正式写手)
1，表达量低可能会出现这种情况，2，设计的引物扩出来的曲线是否正常？3，换其他ROX的酶试试

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9楼2016-06-28 19:30:09
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棍子168

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-25 08:41:11
xn8008: 应助指数+1 2016-06-25 08:47:22
Ct值好多都是三十多，而内参基因的都是二十多，说明你的目的基因表达量也太少了吧，目的基因和内参基因的模板稀释倍数一定要一样吧，要不然没有意义吧
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天道酬勤
2楼2016-06-24 20:06:12
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Harper_sun

木虫 (正式写手)
当然得一样，要不你跑内参基因干啥？

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3楼2016-06-24 23:04:19
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-25 08:41:41
xn8008: 应助指数+1 2016-06-25 08:47:31
Ct30以后就不准了，不能用。稀释倍数必需一样，像你这样的最好换一个表达量第一点的内参基因。
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4楼2016-06-25 07:40:12
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