应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » GFP融合蛋白，能看到荧光，但western blot检测不到
242/3返回列表上一页123下一页
查看: 5315  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhlq_mail

铜虫 (小有名气)
跑胶染色有目的条带吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
11楼2016-06-09 04:20:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

armigera

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
flag的序列能p出来么

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
12楼2016-06-09 09:58:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuxinyueer

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by zhlq_mail at 2016-06-09 04:20:29
跑胶染色有目的条带吗？

跑完胶染色，如何确定目的条带
赞一下 回复此楼
欢迎讨论，小木虫未能及时回复，请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
13楼2016-06-09 15:02:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuxinyueer

木虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by armigera at 2016-06-09 09:58:49
flag的序列能p出来么

可以
回复此楼
欢迎讨论，小木虫未能及时回复，请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
14楼2016-06-09 15:02:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

armigera

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是不是这个目的蛋白上有酶切位点，可以被切下来行使功能或者被ubiquiting降解？别的原因暂时没想到

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
15楼2016-06-09 15:14:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuxinyueer

木虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by armigera at 2016-06-09 15:14:13
是不是这个目的蛋白上有酶切位点，可以被切下来行使功能或者被ubiquiting降解？别的原因暂时没想到

泛素降解的话，就什么都检测不到吗?
赞一下 回复此楼
欢迎讨论，小木虫未能及时回复，请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
16楼2016-06-09 16:58:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

armigera

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
水平有限，这个问题回答不了。抱歉～

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
17楼2016-06-09 17:28:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhlq_mail

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by zhlq_mail at 2016-06-09 04:20:29
跑胶染色有目的条带吗？

1,算出蛋白大小，蛋白marker比对一下，2western，3纯化或切割条带打质谱。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
18楼2016-06-10 12:33:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nomy

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1建议你上research gate网站上看一眼，我感觉前几天我刚看了一个检测gfp融合蛋白的，
2你可以试试用gfp抗体能不能检测。
3是不是目的蛋白flag检测位点被什么东西cover了，虽然sds一般都是变性的，但是也存在不完全变性或者部分复性导致epitope被隐藏，然后进一步导致检测不到
赞一下 回复此楼
19楼2016-06-10 17:21:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuxinyueer

木虫 (正式写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by nomy at 2016-06-10 17:21:27
1建议你上research gate网站上看一眼，我感觉前几天我刚看了一个检测gfp融合蛋白的，
2你可以试试用gfp抗体能不能检测。
3是不是目的蛋白flag检测位点被什么东西cover了，虽然sds一般都是变性的，但是也存在不完全 ...

GFP能检测到。其实这个融合蛋白是含2A site 的，GFP和目的蛋白由2A site连着，细胞内有2Asite的酶，会将这两个蛋白切断。
其实这个蛋白是我做慢病毒载体稳转到细胞中的，而且在稳转前我做过瞬转，瞬转能检测到此蛋白。
赞一下 回复此楼
欢迎讨论，小木虫未能及时回复，请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
20楼2016-06-10 22:09:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liuxinyueer 的主题更新
242/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 2rKfVQg2jQww 2026-11-06 5/250 2026-11-07 17:23 by Xc2FxHsHkBNc
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 5/250 2026-11-07 16:06 by Xc2FxHsHkBNc
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 6/300 2026-11-07 15:44 by Xc2FxHsHkBNc
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 8/400 2026-11-06 16:34 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 18/900 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭