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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 探针法q-pcr的扩增曲线大家帮分析一下
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杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 易水秋寒 at 2016-06-03 08:31:04
你做的是梯度吗，那就是稀释的不好，如果模板是基因组的话不能长时间震荡...

是T载体连接的标准质粒

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11楼2016-06-03 10:04:32
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杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 易水秋寒 at 2016-06-03 08:31:04
你做的是梯度吗，那就是稀释的不好，如果模板是基因组的话不能长时间震荡...

每个样品我都震荡10几分钟，怎么样才能稀释的更好！

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12楼2016-06-03 10:05:11
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fytz007

新虫 (正式写手)
未知样品的话线挺好的，如果是梯度的话，那就不是太好了。

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13楼2016-06-03 11:46:56
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易水秋寒

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by 杨仔儿 at 2016-06-03 10:05:11
每个样品我都震荡10几分钟，怎么样才能稀释的更好！
...

一般vortex3次就行，每次2-3秒就可以混匀
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14楼2016-06-03 15:08:23
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杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by fytz007 at 2016-06-03 11:46:56
未知样品的话线挺好的，如果是梯度的话，那就不是太好了。

问一个问题，我的阴性对照为什么也有扩增曲线，Ct值31。

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15楼2016-06-03 20:55:53
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杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 易水秋寒 at 2016-06-03 15:08:23
一般vortex3次就行，每次2-3秒就可以混匀...

那可能我时间太长了

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16楼2016-06-03 20:56:06
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fytz007

新虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 杨仔儿 at 2016-06-03 20:55:53
问一个问题，我的阴性对照为什么也有扩增曲线，Ct值31。
...

污染了？

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17楼2016-06-03 21:45:11
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杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by fytz007 at 2016-06-03 21:45:11
污染了？
...

不知道啊，今天问了一个职工师兄，理论上只要存在荧光基团就会有扩增曲线，我打算明天做多个对照看一下，结果如何，到时候和你分享一下

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18楼2016-06-03 21:54:13
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txing

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
模板稀释问题，要么是加样量控制不好，或者两者都有
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19楼2016-06-04 06:33:07
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杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by txing at 2016-06-04 06:33:07
模板稀释问题，要么是加样量控制不好，或者两者都有

好的

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20楼2016-06-04 09:16:39
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