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PCR产物是引物二聚体
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lycpu
金虫
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(幼儿园)
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PCR产物是引物二聚体
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20ul体系,模板DNA 1ul, dNTP 2ul,buffer 2ul, Ex-Taq酶0.2ul,上下游引物都是0.5ul, dd水14ul.
PCR的反应条件是:预变性 94℃ 5min, 变性94℃ 30s, 退火 68℃ 45s, 64℃45s延伸 72℃ 45s, 延伸72℃ 10min, 30个循环。做了两组,退火温度做了两个一个68℃,一个64℃.两个引物都是2000多bp.一直都扩不出来,求助各位虫友分析分析。Marker是DL5000的。
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1楼
2016-05-28 22:30:10
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風之叶落
金虫
(初入文坛)
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(幼儿园)
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帖子: 19
在线: 4.4小时
虫号: 2355169
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
退火温度,可以做一个温度梯度。或者做PCR的时候加一微甘油(20微体系)试试
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33楼
2016-06-17 18:27:26
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小乌龟金牛
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2016-05-28 22:30
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Yuanfang_818
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jpf117
4楼
2016-05-28 22:30
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leehong816
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2016-05-28 22:30
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adrian2
6楼
2016-05-28 22:30
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xmczzw
7楼
2016-05-28 22:30
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空气中的绿色
8楼
2016-05-28 22:30
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ychem
9楼
2016-05-28 22:30
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mq3368_cn
10楼
2016-05-28 22:30
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李庆鑫
11楼
2016-05-28 22:30
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广昂
12楼
2016-05-28 22:30
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ywj3636
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2016-05-28 22:30
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豆浆娜娜
14楼
2016-05-28 22:30
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