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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物是引物二聚体
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lycpu

金虫 (小有名气)
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PCR产物是引物二聚体
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20ul体系，模板DNA 1ul, dNTP 2ul，buffer 2ul, Ex-Taq酶0.2ul,上下游引物都是0.5ul, dd水14ul.
PCR的反应条件是：预变性 94℃ 5min, 变性94℃ 30s, 退火 68℃ 45s, 64℃45s延伸 72℃ 45s, 延伸72℃ 10min, 30个循环。做了两组，退火温度做了两个一个68℃，一个64℃.两个引物都是2000多bp.一直都扩不出来，求助各位虫友分析分析。Marker是DL5000的。

PCR产物是引物二聚体


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1楼 2016-05-28 22:30:10
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super_mm

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引物特异性不强或者退火温度不合适，可以多试几个Tm，梯度拉大一些
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27楼2016-06-02 15:15:18
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小乌龟金牛2楼
2016-05-28 22:30   回复  
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Yuanfang_8183楼
2016-05-28 22:30   回复  
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jpf1174楼
2016-05-28 22:30   回复  
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leehong8165楼
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adrian26楼
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xmczzw7楼
2016-05-28 22:30   回复  
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空气中的绿色8楼
2016-05-28 22:30   回复  
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ychem9楼
2016-05-28 22:30   回复  
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mq3368_cn10楼
2016-05-28 22:30   回复  
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李庆鑫11楼
2016-05-28 22:30   回复  
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广昂12楼
2016-05-28 22:30   回复  
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ywj363613楼
2016-05-28 22:30   回复  
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豆浆娜娜14楼
2016-05-28 22:30   回复  
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