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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 用菌液摇提取质粒浓度很低！
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yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 用菌液摇提取质粒浓度很低！ 已有5人参与

试了好几次。菌液PCR有结果，测序也对。然后提取质粒浓度很低不到100，有时候不到50，同一批提的其他的就很高。
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1楼 2016-05-27 08:56:32
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yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 原野漫漫 at 2016-05-27 09:02:07
复制原点是不是本身就不是高拷贝质粒

因为之前做过，提的浓度挺高的。最近用同样的原始菌液扩大培养都是那样

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7楼2016-05-28 18:43:16
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丫头的格格巫

新虫 (初入文坛)
质粒本来的拷贝不高？试剂盒提么？

发自小木虫IOS客户端
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2楼2016-05-27 09:02:03
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原野漫漫

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
3楼2016-05-27 09:02:07
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030Selma

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香，谢谢你的理解与支持。myprayer祝您科研顺利，文章多多。 2016-05-27 22:35:11
yangyang1991: 金币+1, ★有帮助 2016-05-28 18:44:06
我们的试剂盒小提的，试剂盒写每次有1-40ug，之前老师提取的是80ng per ul, 我昨天也提了一个，比80多一点点快90的样子，一共50ul洗脱，已经达到试剂盒的高限了。也没有你说的那么严重，如果浓度不是很高的话。
序列验证正确，要不就是你的菌液浓度不太够，这个可以多次收集菌体后再提。要不就是浓度够了，但质粒拷贝数不高，这个也得多收集菌体富集

发自小木虫IOS客户端
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4楼2016-05-27 09:24:30
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