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hshever

金虫 (正式写手)

[交流] DTT还原抗体二硫键的问题

最近做实验,用DTT还原抗体,没有加其他的变性剂,比如SDS,盐酸胍,尿素等,那么问题来了,DTT首先还原的是抗体那个位置的二硫键啊,是铰链区的还是抗体重链和轻链之间的,相关资料上哪里查啊。
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呵呵
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sexymengmeng

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
18楼: Originally posted by hshever at 2016-05-29 09:58:58
你是质谱分析的啊,果然专业。我现在的试验是只用DTT,不用SDS或者尿素之类的把抗体给先打开,好像只用DTT的话包裹在抗体内部的二硫键不容易被打开,我不太清楚轻重链间的二硫键和铰链区域的二硫键那个是包裹在内部 ...

你是要质谱分析,还是要干嘛呢?你用了SDS或者尿素,后面就不太好上质谱了。SDS和尿素是为了打开蛋白结构,使其变性,的确可以帮助DTT更有效的打开二硫键。只用DTT的话,抗体内部二硫键不容易完全打开。轻重链和铰链区都不算抗体内部二硫键,不变形也很容易打开的。
19楼2016-05-29 20:31:33
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hshever(金币+1): 谢谢参与
2楼2016-05-27 00:30:09
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