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SDS-PAGE M形 鬼带原因是什么已有1人参与
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最近做SDS-PAGE(好久没有做过了),样品是原核表达的蛋白上清液(超滤管浓缩,并除盐)和菌体超声破碎后上清液(超滤管浓缩,并除盐),15% 分离胶。 电泳结果显示菌体破碎蛋白最前端的蛋白(小分子的)都呈现M形条带,邻近的上清蛋白及Marker 都相对正常? 有人遇到这种情况不,神马原因? M shaped.jpg |
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superwenli
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8楼2016-05-27 20:31:38
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2楼2016-05-25 13:49:08
7楼2016-05-27 19:57:31
jiangronglu
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分离胶太短,浓缩胶浓度好了,另外上样时菌体需要处理,可以煮沸10min,如果很稠的话可以采用离心,取上清上样,顺便控制上样量,12000转离心10min后上就OK了 发自小木虫Android客户端 |

9楼2016-05-28 07:38:28
沉默、颜泪
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首先,Marker条带挺好,胶配置比较均匀。其次,你的样品量太高!但是,一般来说,样品量过高,影响蛋白的分离效果(分不开)。你这样的情况,真第一次见!我个人认为:应该是小分子蛋白的原因,一,浓度实在太高;二,变性剂加少了或者煮沸变性不充分,三、该条带的蛋白自身有问题。祝好运! 发自小木虫Android客户端 |
10楼2016-05-29 00:59:04
hc-material
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3楼2016-05-25 14:19:17
stabilized
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