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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 求助：关于制备HPLC分离乌头类生物碱的问题
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leonard187

木虫 (著名写手)

[交流] 求助：关于制备HPLC分离乌头类生物碱的问题

最近做了草乌总碱的进一步分离。
分析HPLC用的流动相：甲醇-水（0.1%三乙胺）-氯仿 80：20：2
制备时没加三乙胺，结果发现柱压力很高（140左右，最大承受柱压力是200），拆下柱子发现保护住压力130多。估计是保护住堵了。
请问各位朋友，我该用什么冲洗保护住呢？最好可以回收里面的物质（因为是我的样品啊）。有人说用酸，我觉得成盐析出就更麻烦了，没敢用。现在用甲醇-水（0.1%三乙胺）-氯仿 80：20：2在冲。大家给个建议吧。谢谢了。
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1楼 2008-10-31 14:10:05
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science2008

木虫 (正式写手)
★ ★
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~！ o(∩_∩)o...
leonard187(金币+1,VIP+0):谢谢指教，反冲好像对柱子不大好……
如果你想回收你的样品，建议你把保护柱反冲，接上未堵的，色谱柱。
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2楼2008-10-31 21:09:13
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kkbyb

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
xiaohezi7844(金币+1,VIP+0):非常感谢
leonard187(金币+2,VIP+0):谢谢咯，我可没用石油醚层。我们这个保护住貌似也不便宜。氯仿不敢加多。不过目前看我加了三乙胺进去效果还行。
leonard187(金币+2,VIP+0):没有人回帖子了，剩下的都给你吧。
涉及回收问题比较麻烦，忘加三乙胺至多影响峰形，也不会使样品挂在柱上，当然要是用石油醚层上柱就是你的问题了，但一般生物碱多在氯仿层，色谱保护住不是很贵，可以用氯仿冲冲（前提是死马当做活马医，万不得已上氯仿）。大不了挖出填料重新填新的。还有就是异丙醇是个好东西。
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3楼2008-10-31 22:51:29
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