11楼: Originally posted by 18862141107 at 2016-05-19 18:54:43
Takara的BamHI和HindIII双酶切我们也经常用，我个人是0.5ul的，一直正常，其他人也有用1和1.5的，也没问题

13楼: Originally posted by 啄木鸟HXH at 2016-06-25 23:09:20
你好，我现在也碰到类似问题，我是空pet-32a直接转DH5a怎么都不长阳性克隆，能向你请教相关问题嘛？

16楼: Originally posted by pjxiongjing at 2016-09-01 22:45:40
请问你蛋白表达之后，后期要纯化么

15楼: Originally posted by 曼陀罗的祈祷 at 2016-07-04 18:19:57
我只回答一下8的问题，摇了6h的时候OD才到0.6,会不会是菌种在传代过程中活性降低，要不试试提质粒重新转入表达菌株，我的也遇到过类似的情况

7楼: Originally posted by sxxuan at 2016-05-19 09:36:42
我试过普通双酶切2h，纯化后直接1ul转化感受态细胞，也长菌了是否代表没有完全酶切？
连接体系20ul，一般拿10ul去转化，然后全部菌拿去涂板，是否太多？但长出来的菌落也不是很多。...