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银虫 (小有名气)

[求助] 酶切产物回收作模板，PCR产物电泳条带微弱已有1人参与

相同的反应条件，以质粒为模板扩增，电泳条带很亮，酶切产物做模板，条带很弱

发自小木虫Android客户端

流年似水，看不透的是红尘中镜花水月；往事如烟，挥不去的是岁月荏苒一过往；待得繁华落尽，只余回忆。

1楼 2016-05-16 15:02:23

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金虫 (正式写手)

感谢参与，应助指数 +1

1、内切酶酶切位点在PCR产物序列内部，切开之后就无法扩增了；PS-有没有完全切开的还是可以扩增的。
2、酶切产物是否纯化，酶切体系中的物质会不会影响PCR体系；（纯属猜想，仅供参考）
3、再有其他原因，就只能想到实验误差了。

谢谢

没有做不到，只有想不到！

2楼2016-05-16 15:44:22

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金虫 (小有名气)

对于酶切产物的话（目的片段＞100bp以上）可以没有必要进行回收，直接用pcr产物纯化的方式更快，效率也不会比胶回收差

3楼2016-05-16 21:56:48

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