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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒双酶切。
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yuan720222

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒双酶切。 已有5人参与

提取的质粒，经过双酶切，目的片段是2781bp，载体的片段是2686bp经双酶切后，发现只有一条带，目的片段和载体都处于一个位置，怎么才能跑开两条带？紧急紧急
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1楼 2016-05-07 07:12:56
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liuyuxue

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yuan720222 at 2016-05-07 18:46:30
你好，我的目的片段是2781bp,载体片段是2686bp，质粒双酶切后。跑电泳，结果显示就一条带，在2000-3000之间。...

你做完双酶切之后，再接着做个单酶切，把载体片段再切开，然后电泳就能分开了
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花落人亡两不知
8楼2016-05-07 21:09:47
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liuyuxue

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不行再做一次酶切，找个在载体片段上有酶切位点的
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花落人亡两不知
2楼2016-05-07 10:12:01
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
明显用3酶切，把载体上有的单一位点一起切了，载体被切切碎不就行了么
赞一下(5人) 回复此楼
3楼2016-05-07 10:37:32
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yuan720222

新虫 (初入文坛)
你好，是对载体上的每一个酶切位点（除目的片段所包含的）都进行单酶切吗
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4楼2016-05-07 18:40:48
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