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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 自己设计的引物，PCR后出现多条带～
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半仙0356

新虫 (正式写手)

[交流] 自己设计的引物，PCR后出现多条带～

自己设计的引物，PCR后电泳出现多条带，引物回来的时候上面标的退火温度不准，怎么破？？？求大神～

自己设计的引物，PCR后出现多条带～


自己设计的引物，PCR后出现多条带～-1


自己设计的引物，PCR后出现多条带～-2


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1楼 2016-04-22 16:40:35
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半仙0356

新虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by stone2239 at 2016-04-22 21:47:49
感觉你这个不完全是温度的问题，你把退火温度提高，延伸时间用的多长？150bp的片段20秒应该就够了。还不行的话，建议换引物，可能是你的引物特异性不好。

延伸时间是30秒，

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15楼2016-04-23 06:11:28
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red-bri

新虫 (小有名气)
★
半仙0356(金币+1): 谢谢参与
引物上面只是推荐的，并不能拿来直接做实验的，要先温度梯度预实验的。

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3楼2016-04-22 17:05:30
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★
半仙0356(金币+1): 谢谢参与
你想扩的目标带多大？怎么会出那么多条带。
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7楼2016-04-22 18:24:28
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半仙0356

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by stone2239 at 2016-04-22 18:24:28
你想扩的目标带多大？怎么会出那么多条带。

我的目标带大概是150左右，我也不知道怎么回出现那么多条带～

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8楼2016-04-22 20:53:31
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