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半仙0356

新虫 (正式写手)


[交流] 自己设计的引物,PCR后出现多条带~

自己设计的引物,PCR后电泳出现多条带,引物回来的时候上面标的退火温度不准,怎么破???求大神~

自己设计的引物,PCR后出现多条带~


自己设计的引物,PCR后出现多条带~-1


自己设计的引物,PCR后出现多条带~-2


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半仙0356

新虫 (正式写手)


引用回帖:
13楼: Originally posted by jingyu90217 at 2016-04-23 00:56:02
引物设计的如果没问题(二级结构,GC含量,引物间配对等),就是评论里大家说的要摸Tm梯度。引物合成单回来的上下游温度之和除2减5。然后以这个温度为中间值。上下各隔2度试下。
...

谢谢咯O(∩_∩)O

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14楼2016-04-23 06:10:28
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red-bri

新虫 (小有名气)



半仙0356(金币+1): 谢谢参与
引物上面只是推荐的,并不能拿来直接做实验的,要先温度梯度预实验的。

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3楼2016-04-22 17:05:30
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)



半仙0356(金币+1): 谢谢参与
你想扩的目标带多大?怎么会出那么多条带。
7楼2016-04-22 18:24:28
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半仙0356

新虫 (正式写手)


引用回帖:
7楼: Originally posted by stone2239 at 2016-04-22 18:24:28
你想扩的目标带多大?怎么会出那么多条带。

我的目标带大概是150左右,我也不知道怎么回出现那么多条带~

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8楼2016-04-22 20:53:31
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