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图图怪

新虫 (小有名气)

[求助] 核酸提取后酶切电泳成像多一条带? 已有2人参与

基因1557经离心等提质粒后,加TEbuffer溶解,加入buffer和Bam I、HindIII酶切后电泳呈三条带(应该只有两条的)求问原因和解决办法,谢谢各位
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图图怪

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 天机哥哥 at 2016-04-18 12:18:31
多出一条带,可能是没有酶切过的完整质粒,也有可能是只切开了一个酶切位点的线性质粒,其主要原因在于酶切不完全,建议酶切时间适当延长!!!

谢谢,我还想问一下,我同学用酶hindIII,一样的时间和条件,他切出来是对的,两条带,我的情况是因为bamHI酶要求酶切时间比较长么?我用空质粒跑电泳出现很多条带,但是两种酶切好几次跑出来都是三条带==

发自小木虫Android客户端
4楼2016-04-20 22:53:29
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天机哥哥

禁虫 (小有名气)

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2楼2016-04-18 12:18:31
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守望海贝

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
酶切不完全,改善方法:可以适当延长酶切时间、增加酶量,另外看酶有没有过期
3楼2016-04-18 16:48:45
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天机哥哥

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

5楼2016-04-21 12:06:11
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