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自制奶酪

铜虫 (小有名气)

[求助] Novozym 435 已有3人参与

我最近在测Novozym 435的酶活按照国标上对脂肪酶的测定进行检测,检测方法是水解橄榄油用NaoH滴定。最终测得酶活为1300,并没有像说明书上说的有10000酶活,导师说测不出同样的酶活就不给做实验,我已经测量好几次了,40℃(国标),60℃也试过,也将固定化的酶粉碎之后再测,然而就是达不到说明书上宣称的酶活。酶是厂家给的少量试用酶,求各位大神指点啊!!
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简单快乐
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飘逸的云

新虫 (小有名气)

诺维信435的标称活力是指橄榄油水解活力吗?我记得标称的有可能不是指水解活力。我在做脂肪酶的固定化,感觉固定化酶的水解活力和游离酶的水解活力差很多,不知道你现在有没有发现你的诺维信435测水解活力那么低的原因了?
2楼2016-04-18 20:17:45
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micropan

新虫 (小有名气)

3楼2016-04-18 21:40:44
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自制奶酪

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by micropan at 2016-04-18 21:40:44
单位PLU?

不是,那是官方的单位,合成月桂酸丙酯的,我的单位是每克酶每分钟水解出多少μmol的脂肪酸

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简单快乐
4楼2016-04-19 00:26:09
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自制奶酪

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飘逸的云 at 2016-04-18 20:17:45
诺维信435的标称活力是指橄榄油水解活力吗?我记得标称的有可能不是指水解活力。我在做脂肪酶的固定化,感觉固定化酶的水解活力和游离酶的水解活力差很多,不知道你现在有没有发现你的诺维信435测水解活力那么低的原 ...

我现在不论是将固定化的脂肪酶研碎,充分溶解再测,还是直接测固定化的脂肪酶酶活,其酶活也就1000多点,远达不到10000,我想知道你测得酶活大致是多少
简单快乐
5楼2016-05-13 14:18:06
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sillysmile

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

要按他们说明书上指定的assay测,不同的反应底物和条件,会给出不同的活性。要按他们给酶定活性的方法一摸一样测,才能得到接近的结果,而且酶也是会随着储藏时间,逐渐失活,所以也要定期自己给手里的酶做标准的活性测试。不过这个酶还是很稳定的。了解酶的特异性,就会好理解了。

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2016-05-13 14:50:58
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自制奶酪

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by sillysmile at 2016-05-13 14:50:58
要按他们说明书上指定的assay测,不同的反应底物和条件,会给出不同的活性。要按他们给酶定活性的方法一摸一样测,才能得到接近的结果,而且酶也是会随着储藏时间,逐渐失活,所以也要定期自己给手里的酶做标准的活 ...

谢谢。

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简单快乐
7楼2016-05-15 00:18:57
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王小啉

新虫 (小有名气)

你是怎么算稀释倍数的?

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8楼2016-11-30 10:23:25
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strayjuns

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

兄弟,你怎么可以用国标法测呢!普通脂肪酶才卖多少钱,这个卖多少钱?这个酶有专门的测试方法的,你去找找那个测试方法,在测试下,就行了
国产优质固定化脂肪酶,媲美诺维信435,更高性价比
9楼2017-05-19 14:47:48
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strayjuns

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 自制奶酪 at 2016-04-19 00:26:09
不是,那是官方的单位,合成月桂酸丙酯的,我的单位是每克酶每分钟水解出多少μmol的脂肪酸
...

既然你自己都知道诺维信的单位含义,人家又没说任何反应酶活都是1万,好搞笑
国产优质固定化脂肪酶,媲美诺维信435,更高性价比
10楼2017-06-16 10:32:08
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