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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 催化 » 催化反应 » Novozym 435
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自制奶酪

铜虫 (小有名气)

[求助] Novozym 435 已有3人参与

我最近在测Novozym 435的酶活按照国标上对脂肪酶的测定进行检测，检测方法是水解橄榄油用NaoH滴定。最终测得酶活为1300，并没有像说明书上说的有10000酶活，导师说测不出同样的酶活就不给做实验，我已经测量好几次了，40℃（国标），60℃也试过，也将固定化的酶粉碎之后再测，然而就是达不到说明书上宣称的酶活。酶是厂家给的少量试用酶，求各位大神指点啊！！
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简单快乐
1楼 2016-04-16 18:00:00
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飘逸的云

新虫 (小有名气)
诺维信435的标称活力是指橄榄油水解活力吗？我记得标称的有可能不是指水解活力。我在做脂肪酶的固定化，感觉固定化酶的水解活力和游离酶的水解活力差很多，不知道你现在有没有发现你的诺维信435测水解活力那么低的原因了？
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2楼2016-04-18 20:17:45
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micropan

新虫 (小有名气)
单位PLU?

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3楼2016-04-18 21:40:44
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自制奶酪

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by micropan at 2016-04-18 21:40:44
单位PLU?

不是，那是官方的单位，合成月桂酸丙酯的，我的单位是每克酶每分钟水解出多少μmol的脂肪酸

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简单快乐
4楼2016-04-19 00:26:09
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自制奶酪

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飘逸的云 at 2016-04-18 20:17:45
诺维信435的标称活力是指橄榄油水解活力吗？我记得标称的有可能不是指水解活力。我在做脂肪酶的固定化，感觉固定化酶的水解活力和游离酶的水解活力差很多，不知道你现在有没有发现你的诺维信435测水解活力那么低的原 ...

我现在不论是将固定化的脂肪酶研碎，充分溶解再测，还是直接测固定化的脂肪酶酶活，其酶活也就1000多点，远达不到10000，我想知道你测得酶活大致是多少
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简单快乐
5楼2016-05-13 14:18:06
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sillysmile

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

要按他们说明书上指定的assay测，不同的反应底物和条件，会给出不同的活性。要按他们给酶定活性的方法一摸一样测，才能得到接近的结果，而且酶也是会随着储藏时间，逐渐失活，所以也要定期自己给手里的酶做标准的活性测试。不过这个酶还是很稳定的。了解酶的特异性，就会好理解了。

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

自制奶酪
6楼2016-05-13 14:50:58
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自制奶酪

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by sillysmile at 2016-05-13 14:50:58
要按他们说明书上指定的assay测，不同的反应底物和条件，会给出不同的活性。要按他们给酶定活性的方法一摸一样测，才能得到接近的结果，而且酶也是会随着储藏时间，逐渐失活，所以也要定期自己给手里的酶做标准的活 ...

谢谢。

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简单快乐
7楼2016-05-15 00:18:57
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王小啉

新虫 (小有名气)
你是怎么算稀释倍数的？

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8楼2016-11-30 10:23:25
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strayjuns

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

兄弟，你怎么可以用国标法测呢！普通脂肪酶才卖多少钱，这个卖多少钱？这个酶有专门的测试方法的，你去找找那个测试方法，在测试下，就行了
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国产优质固定化脂肪酶，媲美诺维信435，更高性价比
9楼2017-05-19 14:47:48
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strayjuns

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 自制奶酪 at 2016-04-19 00:26:09
不是，那是官方的单位，合成月桂酸丙酯的，我的单位是每克酶每分钟水解出多少μmol的脂肪酸
...

既然你自己都知道诺维信的单位含义，人家又没说任何反应酶活都是1万，好搞笑
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国产优质固定化脂肪酶，媲美诺维信435，更高性价比
10楼2017-06-16 10:32:08
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