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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 为什么要进行亚克隆？
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成石

银虫 (正式写手)

[求助] 为什么要进行亚克隆？ 已有2人参与

分子小白，问下：在做原核构建或者真核构建的时候，为什么要先进行亚克隆pMD-18T？而不直接将目的基因与表达载体进行酶切酶连，构建重组子？
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1楼 2016-04-16 10:17:26
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天机哥哥

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
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3楼2016-04-16 19:54:45
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bobofof

铜虫 (小有名气)
我都是直接连的。。

发自小木虫Android客户端
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2楼2016-04-16 12:29:18
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yvonne9044

新虫 (正式写手)
方便测序，保存

发自小木虫Android客户端
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4楼2016-04-16 20:15:39
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成石

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 天机哥哥 at 2016-04-16 19:54:45
方便呗，TA克隆的优点在于它能够直接与PCR反应的目的基因直接连接，之后只需要在TA克隆载体上找一个含目的基因的酶切位点酶切下来，然后与表达载体上对应相同的酶切位点酶连即可！！这其中就省去了在目的基因上去寻 ...

如果目的基因已经设计了引物，包括酶切位点。此酶切位点与表达载体上带的酶切位点相同。那该如何？是不是可以直接拿目的基因和表达载体分别双酶切，然后再酶连，构建重组表达载体？
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置心一处，置身一处，无事不办！
5楼2016-04-16 20:19:01
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