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可爱多了金虫 (小有名气)
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羧基磁珠和氨基DNA连接 已有4人参与
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| 各位大侠，我最近在做羧基修饰的磁珠和氨基修饰的DNA连接，由于我是新手，之前没接触过，请大侠给一份详细的连接步骤，小弟不胜感激 |
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9楼2016-04-25 16:16:42
yanliang12
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2楼2016-04-15 21:26:27
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3楼2016-04-16 20:41:06
4楼2016-04-17 10:27:34
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5楼2016-04-18 21:33:18
【答案】应助回帖
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可爱多了: 金币+5 2016-04-20 10:31:14
可爱多了: 金币+5 2016-04-20 10:31:14
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先取一定量磁珠溶解在MES buffer中，加入8mgEDC12mgNHS(量可以变，比例最好不变)，超声3分钟，37度震荡15分钟。（弱酸性环境中活化羧基） 分离后加入溶解在生理盐水中的DNA（不用洗涤），37度震荡1小时。加入封闭液封闭反应位点，37度继续震荡1小时。 分离清洗后分散在中性buffer中。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-04-19 07:16:43
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7楼2016-04-20 10:39:10
【答案】应助回帖
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我的磁珠是100毫克每毫升，每次用15微升。多用少用点没大关系。我连的是抗体，终浓度是100微克每毫升。不过原理是一样的，都是连接羧基和氨基的。检测是否连上了，可以通过水合粒径，电位，红外等表征。最直接的就是实验现象出来了，那就肯定接上了。 发自小木虫Android客户端 |
8楼2016-04-20 12:54:21
shenhaiwang
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10楼2016-05-18 11:42:10