24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1651  |  回复: 20

卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by sandycool at 2016-04-13 16:45:32
这样的问题怎么解决啊?我用primer5.0设计的引物,得分100分,怎么会跑出二聚体呢?
...

得分高不一定好用呀。适当提高退火温度,减少引物量。
11楼2016-04-13 19:23:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)

不加模版,作阴性对照可以确定是不是引物二聚体,软件设计的评分再高也要按实验为主,有时候就算软件的评分很低引物也是可以扩出条带的,分数只是参考

发自小木虫Android客户端
12楼2016-04-13 20:44:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sandycool

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 梅太奇阿拉干 at 2016-04-13 20:44:44
不加模版,作阴性对照可以确定是不是引物二聚体,软件设计的评分再高也要按实验为主,有时候就算软件的评分很低引物也是可以扩出条带的,分数只是参考

好的,非常感谢!

发自小木虫Android客户端
13楼2016-04-13 21:11:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yml11

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by sandycool at 2016-04-13 16:42:41
DL2000marker,肯定是二聚体了吧
...

应该是的。不放心的话也可以测序看看

发自小木虫IOS客户端
14楼2016-04-14 13:58:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sandycool

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by yml11 at 2016-04-14 13:58:15
应该是的。不放心的话也可以测序看看
...

嗯,好的,谢谢!我重新设计引物

发自小木虫Android客户端
15楼2016-04-14 16:46:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smilyhr

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
marker是DL2000吧,应该是二聚体,引物少用一点
16楼2016-04-15 14:50:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sandycool

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
16楼: Originally posted by smilyhr at 2016-04-15 14:50:40
marker是DL2000吧,应该是二聚体,引物少用一点

先是用premix taq,上下游引物各1微,后来用普通的taq酶,减少上下游引物各0.5微,还是二聚体,就是引物的问题了吧。不会继续减少引物的量了吧

发自小木虫Android客户端
17楼2016-04-15 14:58:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingyu90217

新虫 (小有名气)

18楼2016-04-16 00:53:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smilyhr

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
17楼: Originally posted by sandycool at 2016-04-15 14:58:48
先是用premix taq,上下游引物各1微,后来用普通的taq酶,减少上下游引物各0.5微,还是二聚体,就是引物的问题了吧。不会继续减少引物的量了吧
...

20微升体系加0.5微升引物是正常的了,既然模版没问题那就是引物的问题,重新合一条吧,18s后面那么多泳道都是同一个东西吗?

发自小木虫Android客户端
19楼2016-04-16 07:28:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sandycool

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
18楼: Originally posted by jingyu90217 at 2016-04-16 00:53:48
阴性也是这样吗?

对,跑阴性也是这样,可以确定引物问题

发自小木虫Android客户端
20楼2016-04-16 08:03:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sandycool 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 283分求调剂 +4 试试看呗 2026-04-04 4/200 2026-04-04 13:00 by tujia213
[考研] 085600材料与化工调剂 +26 kikiki7 2026-03-30 27/1350 2026-04-04 09:18 by qlm5820
[考研] 283分材料与化工求调剂 +29 罗KAKA 2026-04-02 29/1450 2026-04-03 23:56 by userper
[考研] 295求调剂 +3 尚偌呀 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:23 by zhq0425
[考研] 11408,335分,本科211,求调剂,可转专业 +3 鳄梨大鳄鱼 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:18 by zhq0425
[考研] 调剂 +5 asdasdassda 2026-04-03 6/300 2026-04-03 20:27 by 岸上的一条鱼
[考研] 考研调剂 +3 Draa 2026-04-03 3/150 2026-04-03 17:37 by hgwz7468
[考研] 考研调剂 +8 不爱喝饮料 2026-04-03 8/400 2026-04-03 16:40 by Mistake-J
[考研] 334求调剂 +9 Trying] 2026-03-31 9/450 2026-04-03 15:18 by 琢珥丶
[考研] 085501一志愿天工大,机械专硕求调剂,跨材料 +3 33上 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:08 by 1753564080
[考研] 一志愿中国科学院大学265求调剂 +9 恬淡ye 2026-03-31 10/500 2026-04-03 11:10 by txp1986
[考研] 071000生物学调剂 +8 知昭蔓 2026-04-02 8/400 2026-04-03 10:36 by macy2011
[考研] 326求调剂 +10 崽崽仔 2026-04-02 10/500 2026-04-03 09:08 by 帕尔马拉特
[考研] 260求调剂 +6 朱芷琳 2026-04-02 6/300 2026-04-02 20:27 by 6781022
[考研] 找调剂 +6 楚乔乔 2026-04-01 6/300 2026-04-02 12:06 by xiaoranmu
[考研] 377求调剂 +3 RASKIN 2026-04-02 3/150 2026-04-02 09:45 by zzchen2000
[考研] 材料求调剂 +8 呢呢妮妮 2026-04-01 8/400 2026-04-02 07:13 by yjolah
[考研] 环境工程调剂 +9 hyzzzzzzz. 2026-04-01 9/450 2026-04-01 14:20 by salamander`
[考研] 土木304求调剂 +5 顶级擦擦 2026-03-31 5/250 2026-04-01 08:15 by fdcxdystjk¥
[考研] 080500-315分复试调剂 +9 上岸3821 2026-03-31 9/450 2026-03-31 17:29 by 唐沐儿
信息提示
请填处理意见