应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 各位大神看一下我的PCR图
212/3返回列表上一页123下一页
查看: 1575  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by sandycool at 2016-04-13 16:45:32
这样的问题怎么解决啊？我用primer5.0设计的引物，得分100分，怎么会跑出二聚体呢？
...

得分高不一定好用呀。适当提高退火温度，减少引物量。
赞一下 回复此楼
11楼2016-04-13 19:23:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)
不加模版，作阴性对照可以确定是不是引物二聚体，软件设计的评分再高也要按实验为主，有时候就算软件的评分很低引物也是可以扩出条带的，分数只是参考

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
12楼2016-04-13 20:44:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sandycool

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 梅太奇阿拉干 at 2016-04-13 20:44:44
不加模版，作阴性对照可以确定是不是引物二聚体，软件设计的评分再高也要按实验为主，有时候就算软件的评分很低引物也是可以扩出条带的，分数只是参考

好的，非常感谢！

发自小木虫Android客户端
回复此楼
13楼2016-04-13 21:11:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yml11

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by sandycool at 2016-04-13 16:42:41
DL2000marker，肯定是二聚体了吧
...

应该是的。不放心的话也可以测序看看

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
14楼2016-04-14 13:58:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sandycool

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by yml11 at 2016-04-14 13:58:15
应该是的。不放心的话也可以测序看看
...

嗯，好的，谢谢！我重新设计引物

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
15楼2016-04-14 16:46:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smilyhr

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
marker是DL2000吧，应该是二聚体，引物少用一点
赞一下 回复此楼
16楼2016-04-15 14:50:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sandycool

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by smilyhr at 2016-04-15 14:50:40
marker是DL2000吧，应该是二聚体，引物少用一点

先是用premix taq，上下游引物各1微，后来用普通的taq酶，减少上下游引物各0.5微，还是二聚体，就是引物的问题了吧。不会继续减少引物的量了吧

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
17楼2016-04-15 14:58:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingyu90217

新虫 (小有名气)
阴性也是这样吗？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
18楼2016-04-16 00:53:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smilyhr

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
17楼: Originally posted by sandycool at 2016-04-15 14:58:48
先是用premix taq，上下游引物各1微，后来用普通的taq酶，减少上下游引物各0.5微，还是二聚体，就是引物的问题了吧。不会继续减少引物的量了吧
...

20微升体系加0.5微升引物是正常的了，既然模版没问题那就是引物的问题，重新合一条吧，18s后面那么多泳道都是同一个东西吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
19楼2016-04-16 07:28:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sandycool

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by jingyu90217 at 2016-04-16 00:53:48
阴性也是这样吗？

对，跑阴性也是这样，可以确定引物问题

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
20楼2016-04-16 08:03:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sandycool 的主题更新
212/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭