24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1890  |  回复: 11

zhangchong12

新虫 (小有名气)

[求助] 关于短的pcr产物的回收 已有5人参与

有没有哪位大神知道关于pcr产物小于300bp的回收方法,本来用琼脂糖凝胶回收加入了异丙醇,可是回收的浓度仍然很低,有没有大神知道有哪种方法可效率较高的回收,急求

@biostar2009 @wizardfan 发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果片段易得,可以多做几个平行PCR。然后将四五个样回收时用同一个柱子过滤,用35-45ul去洗脱回溶。当然还得加异丙醇。
2楼2016-04-04 18:55:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个要看你的pcr产物浓度有多高,然后来确定造成回收浓度不高的原因,是pcr浓度不高,还是胶回收损失很多?300bp也不是非常小的片段,应该不至于影响回收,祝好!

发自小木虫Android客户端
天空才是极限,我有信心飞的更高!
3楼2016-04-04 21:01:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

zhangchong12

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-04 18:55:27
如果片段易得,可以多做几个平行PCR。然后将四五个样回收时用同一个柱子过滤,用35-45ul去洗脱回溶。当然还得加异丙醇。

我加了异丙醇 可是浓度提高并不是很明显

发自小木虫IOS客户端
4楼2016-04-05 14:03:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangchong12

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-04-04 21:01:40
这个要看你的pcr产物浓度有多高,然后来确定造成回收浓度不高的原因,是pcr浓度不高,还是胶回收损失很多?300bp也不是非常小的片段,应该不至于影响回收,祝好!

想问下 如果片断在180bp左右 还可以用胶回收吗 今天回收了浓度很小 在8ng每微升

发自小木虫IOS客户端
5楼2016-04-05 14:04:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kungfu2016

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
将pcr循环数加大,采用柱子回收

发自小木虫Android客户端
6楼2016-04-06 23:13:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccandcc

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用高一些浓度的胶回收就可以,我记得好像是3%就行
7楼2016-04-07 11:18:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangchong12

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by ccandcc at 2016-04-07 11:18:25
用高一些浓度的胶回收就可以,我记得好像是3%就行

是在 用胶回收试剂盒回收的时候 回收不回来 片断187bp

发自小木虫IOS客户端
8楼2016-04-07 11:41:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccandcc

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by zhangchong12 at 2016-04-07 11:41:53
是在 用胶回收试剂盒回收的时候 回收不回来 片断187bp
...

我回收过比你这个更短的,回收不来是不是你pcr出来的量不够。
我们当时是做成非表达质粒,在大肠杆菌中复制,然后酶切胶回收。
更短的弄了好多
9楼2016-04-08 07:58:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangchong12

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by ccandcc at 2016-04-08 07:58:55
我回收过比你这个更短的,回收不来是不是你pcr出来的量不够。
我们当时是做成非表达质粒,在大肠杆菌中复制,然后酶切胶回收。
更短的弄了好多...

怎样做非表达质粒啊

发自小木虫IOS客户端
10楼2016-04-15 23:04:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhangchong12 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 求调剂 有机化学考研356分 +11 Nadiums 2026-03-25 12/600 2026-03-31 18:24 by oooqiao
[考研] 安徽大学专硕生物与医药专业(086000)324分,英语已过四六级,六级521,求调剂 +9 美味可乐鸡翅 2026-03-26 10/500 2026-03-31 18:17 by jp9609
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +9 手机用户 2026-03-26 9/450 2026-03-31 18:09 by 544594351
[考研] 288资源与环境专硕求调剂,不限专业,有学上就行 +19 lllllos 2026-03-30 19/950 2026-03-31 16:48 by shengliu165
[考研] 315求调剂 +6 akie... 2026-03-28 7/350 2026-03-31 16:48 by asdfzly
[考研] 考研调剂求助 +7 13287130938 2026-03-31 7/350 2026-03-31 16:39 by 690616278
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +9 李李不服输 2026-03-25 9/450 2026-03-31 16:25 by hypershenger
[考研] 353求调剂 +3 江上枫_26 2026-03-28 3/150 2026-03-31 15:53 by jp9609
[考研] 070300化学279求调剂 +7 哈哈哈^_^ 2026-03-31 9/450 2026-03-31 10:02 by cal0306
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-30 5/250 2026-03-31 09:41 by zhshch
[考研] 293分求调剂,外语为俄语 +5 加一一九 2026-03-31 5/250 2026-03-31 09:39 by zhshch
[考研] 11408总分309,一志愿东南大学求调剂,不挑专业 +5 天赋带到THU 2026-03-29 6/300 2026-03-30 20:49 by dick_runner
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工(085600)296求调剂 +25 稻妻小编 2026-03-26 25/1250 2026-03-30 20:11 by 滴滴上岸呀
[考研] 317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求调剂 +12 芋泥小铃铛 2026-03-28 12/600 2026-03-30 17:06 by wangjy2002
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 16:05 by shuang5186
[考研] 一志愿北京工业大学,324分求调剂 +6 零八# 2026-03-28 6/300 2026-03-29 21:20 by nanaliuyun
[考研] 071000生物学求调剂,初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 070300求调剂306分 +4 26要上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-28 13:06 by 唐沐儿
[考研] 265求调剂11408 +3 刘小鹿lu 2026-03-27 3/150 2026-03-27 20:53 by nihaoar
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
信息提示
请填处理意见