24小时热门版块排行榜    

查看: 2047  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhangchong12

新虫 (小有名气)

[求助] 关于短的pcr产物的回收 已有5人参与

有没有哪位大神知道关于pcr产物小于300bp的回收方法,本来用琼脂糖凝胶回收加入了异丙醇,可是回收的浓度仍然很低,有没有大神知道有哪种方法可效率较高的回收,急求

@biostar2009 @wizardfan 发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangchong12

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by ccandcc at 2016-04-08 07:58:55
我回收过比你这个更短的,回收不来是不是你pcr出来的量不够。
我们当时是做成非表达质粒,在大肠杆菌中复制,然后酶切胶回收。
更短的弄了好多...

怎样做非表达质粒啊

发自小木虫IOS客户端
10楼2016-04-15 23:04:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果片段易得,可以多做几个平行PCR。然后将四五个样回收时用同一个柱子过滤,用35-45ul去洗脱回溶。当然还得加异丙醇。
2楼2016-04-04 18:55:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个要看你的pcr产物浓度有多高,然后来确定造成回收浓度不高的原因,是pcr浓度不高,还是胶回收损失很多?300bp也不是非常小的片段,应该不至于影响回收,祝好!

发自小木虫Android客户端
天空才是极限,我有信心飞的更高!
3楼2016-04-04 21:01:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangchong12

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-04 18:55:27
如果片段易得,可以多做几个平行PCR。然后将四五个样回收时用同一个柱子过滤,用35-45ul去洗脱回溶。当然还得加异丙醇。

我加了异丙醇 可是浓度提高并不是很明显

发自小木虫IOS客户端
4楼2016-04-05 14:03:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +31 医学老男孩 2026-08-13 69/3450 2026-08-16 00:16 by mo_mo_mo_mo
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +9 majunge000 2026-08-11 11/550 2026-08-15 23:20 by botar
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +7 Ldrop2023 2026-08-13 7/350 2026-08-15 15:57 by mzhh2000
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见