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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 目的基因的产物问题
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酶不是完全切得动质粒的，有一小部分质粒被2种酶酶切后，它实际只被一个酶酶切了，只是单酶切，一用T4就连上了。质粒被2中酶酶切后出现3种情况，1.BamH I和EcoR I位点  2个
                                    2只被BamH I酶切
                                    3.只被EcoR I酶切
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采菊东篱下，悠然见南山。
11楼2016-03-29 15:36:35
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宏伟10

银虫 (小有名气)
1、质粒两种酶都切了，质粒与目的片段连接成环，
2、质粒只被一种酶切，质粒可以与目的片段连接成为一个直链，
3、质粒只被一种酶切，质粒自连成环，
4、质粒没有被酶切。

   类推目的片段酶切不全。
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开心是福
12楼2016-03-30 15:57:03
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kathybeer

铜虫 (初入文坛)
目的基因、载体双双酶切后胶回收纯化，然后T4连接酶连接，产物应该就是目的基因片段连到载体上，构成重组载体
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13楼2016-03-31 19:47:58
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kathybeer

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

目的基因、载体双酶切后切胶纯化，然后T4连接酶连接，结果应该是目的基因片段连到载体上，构成重组质粒
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14楼2016-03-31 19:53:38
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小秀子子

新虫 (初入文坛)
载体自连  载体与PCR产物相连
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15楼2016-03-31 20:04:09
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