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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 双酶切切不出来目的条带。。。
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-03-27 14:28:38
PCR产物切胶回收目的条带，再酶切、电泳回收目的条带、连接是可以的。...

酶切时间和条带长短是什么关系呢？300 bp和600 bp的大概各需要多长时间？
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11楼2016-03-27 22:55:28
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云端试验室

新虫 (初入文坛)
e生物圈做实验外包做的好

发自小木虫Android客户端
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12楼2016-03-29 12:01:05
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边木殇

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

双酶切切不动试试分开切
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13楼2016-03-29 13:56:49
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kingjazz23

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我个人觉得可能是质粒不纯，我之前也试过这样的情况，切出来有我的目的条带，但是还会出现其他条带，只要回收需要的就可以了。我建议你加大质粒的量，再做酶切。另外一个问题是要考虑内切酶的星活性，可以缩短酶切时间
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14楼2016-05-23 11:20:26
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