应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » primerstar PCR没有条带是为什么呢？
51/1返回列表
查看: 4791  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xianglixie3

铜虫 (小有名气)

[求助] primerstar PCR没有条带是为什么呢？ 已有3人参与

如题，我用Cdna 扩增表达片段大概2000-3000bp。
Cdna 没有问题，扩增了tub 有带。
我用Taq 酶扩增的时候有带，因为不是高保真的酶所以我想用primerstar 获得片段
试过加了6%DMSO  试过 降低退火温度 本来的退火温度是67 降到了62 还是没有条带
延伸时间用的2-3min
求解!
我都整了一个月了 没有带呀 要死要活的。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-03-18 08:38:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王爱沫1

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
6楼2016-03-18 11:24:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xianglixie3: 金币+5, ★★★很有帮助, 终于扩出来了 回收之后也超级亮 谢谢 2016-03-19 08:06:38
cDNA扩增长片段是有各种问题的，模板质量得好，浓度合适；选用合适的酶；引物质量合格，高保真酶是应该用高退火的，你可以按照酶的说明书试验一下，扩增效率2000bp/min吧？不用那么长时间。
赞一下 回复此楼
2楼2016-03-18 09:46:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xianglixie3

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-03-18 09:46:30
cDNA扩增长片段是有各种问题的，模板质量得好，浓度合适；选用合适的酶；引物质量合格，高保真酶是应该用高退火的，你可以按照酶的说明书试验一下，扩增效率2000bp/min吧？不用那么长时间。

你的意思说 它的退火温度应该比普通酶高是吗
我找找说明书重新看看 然后延伸时间降一些 再做一次
赞一下 回复此楼
3楼2016-03-18 09:53:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

卡维斯

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xianglixie3 at 2016-03-18 09:53:24
你的意思说 它的退火温度应该比普通酶高是吗
我找找说明书重新看看 然后延伸时间降一些 再做一次...

对，仔细研究下说明书按他说的就可以，加油
赞一下 回复此楼
4楼2016-03-18 09:58:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 332求调剂 +6 032500 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:45 by 418490947
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 8/400 2026-03-25 20:34 by 热情沙漠
[考研] 招08考数学 +8 laoshidan 2026-03-20 17/850 2026-03-25 17:52 by 一个红太阳
[考研] 085602 289分求调剂 +7 WWW西西弗斯 2026-03-24 7/350 2026-03-25 14:28 by 3Strings
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-20 4/200 2026-03-25 10:16 by allen-yin
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 材料调剂 +6 匹克i 2026-03-23 6/300 2026-03-24 21:09 by greychen00
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 一志愿国科过程所081700，274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭