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xuehu2008铜虫 (正式写手)
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[交流]
求助关于RT-PCR
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各位大侠, 我的RT-PCR结果今天出来了,p了两遍,可是条带大小连目标片段的一般都不到,不知是什么原因啊?是RT的问题还是总RNA提取的问题?我的RT步骤为: 1.总RNA和反义引物混合,70度5min——4度5min——冰上。 2.将以上的模板和引物加入反转录体系,按照Promega的操作说明。 3.25度5min——42度60min——70度15min 4.取第三步反应产物作为PCR的模板,假如一对引物和Taq酶扩增。 求高手帮忙看看。 |
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2楼2008-10-16 22:55:40
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