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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » takara LA-Taq酶可以扩增出1kb以上的片段吗
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木虫 (正式写手)

[交流] takara LA-Taq酶可以扩增出1kb以上的片段吗 已有3人参与

使用takara LA-Taq酶，可以扩增出1kb以上的片段吗？扩增产物的保真性如何？
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1楼 2016-03-14 16:56:24
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HJRong

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-03-14 18:59:43
说明书上有解释呀：
      本制品是应用LA PCR原理研制的具有3′→5′Exonuclease活性（Proof reading活性）的耐热性DNA聚合酶。无论是扩增短链DNA还是长链DNA，其效率都优于其它同类产品，尤其在扩增大于10 kb的D ...

请问为什么该酶既然具有3′→5′Exonuclease活性却依旧能使扩增得到的PCR产物3’端附有一个“A”碱基。不应该被切掉吗？我所查到的3‘-5’外切酶活性是使不能与DNA互补链互补的核苷酸被剪切掉。那这个不是自相矛盾了吗？
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3楼2018-08-29 14:52:01
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卡维斯

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
说明书上有解释呀：
      本制品是应用LA PCR原理研制的具有3′→5′Exonuclease活性（Proof reading活性）的耐热性DNA聚合酶。无论是扩增短链DNA还是长链DNA，其效率都优于其它同类产品，尤其在扩增大于10 kb的DNA片段方面，其优势更加明显，而且保真性能强。使用本制品扩增得到的PCR产物3’端附有一个“A”碱基，因此可直接克隆于T-Vector中
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2楼2016-03-14 18:59:43
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xmcsxq0606

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by HJRong at 2018-08-29 14:52:01
请问为什么该酶既然具有3′→5′Exonuclease活性却依旧能使扩增得到的PCR产物3’端附有一个“A”碱基。不应该被切掉吗？我所查到的3‘-5’外切酶活性是使不能与DNA互补链互补的核苷酸被剪切掉。那这个不是自相矛盾 ...

高保真酶符合你的说法，La不是高保真，是taq的升级版，3端带A

发自小木虫IOS客户端
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4楼2018-08-29 22:05:36
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