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[交流]
96孔板MBC测定
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刚刚入手实验，具体做法为：“将药物溶解，用灭菌海水制成1000μg/mL药品母液。在96孔细胞培养板上，每排的1-12孔各加入100μL 3% NaCl营养肉汤，再取100μL 1000μg/mL药品母液从第一孔做倍比稀释至10孔，稀释完第10孔后弃去100μL，11孔为无药对照, 12孔为空白对照。再加100μL稀释好的105 菌液于每排1-11孔，第12孔加100μL灭菌的海水，充分混匀后加盖，置于30℃温箱中培养24小时后在黑色背景下观察菌的生长情况，以在小孔内完全抑制细菌生长的最低药物浓度为MIC。继续培养48h后观察菌的生长情况，涂平板观察，无菌生长孔所含的最低药物浓度即为MBC。试验时每种菌株对每个菌株做3个重复，当无药对照孔细菌生长良好，所得结果才有效。”不知道用营养肉汤来稀释药液对实验结果是否有影响？还是说应该用灭菌的海水来稀释药液？ |
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