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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 96孔板MBC测定
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123谜儿

新虫 (正式写手)

[交流] 96孔板MBC测定

刚刚入手实验，具体做法为：“将药物溶解，用灭菌海水制成1000μg/mL药品母液。在96孔细胞培养板上，每排的1-12孔各加入100μL 3% NaCl营养肉汤，再取100μL 1000μg/mL药品母液从第一孔做倍比稀释至10孔，稀释完第10孔后弃去100μL，11孔为无药对照, 12孔为空白对照。再加100μL稀释好的105 菌液于每排1-11孔，第12孔加100μL灭菌的海水，充分混匀后加盖，置于30℃温箱中培养24小时后在黑色背景下观察菌的生长情况，以在小孔内完全抑制细菌生长的最低药物浓度为MIC。继续培养48h后观察菌的生长情况，涂平板观察，无菌生长孔所含的最低药物浓度即为MBC。试验时每种菌株对每个菌株做3个重复，当无药对照孔细菌生长良好，所得结果才有效。”不知道用营养肉汤来稀释药液对实验结果是否有影响？还是说应该用灭菌的海水来稀释药液？
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1楼2016-03-14 15:46:21
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Cathering_w

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我觉得应该按照对照来考虑，用灭菌海水吧，菌液离心然后灭菌海水重悬，或者更换为肉汤培养基来作为对照，应该会有一定影响的。建议再查下文献

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30楼2016-03-21 15:27:39
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tableman

木虫之王 (文学泰斗)
★
123谜儿(金币+2): 谢谢参与
祝福楼主了。
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6楼2016-03-14 16:07:14
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