| 查看: 1180 | 回复: 11 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
关于表达一个蛋白 已有6人参与
|
|||
|
我的目的基因连接了pet 32a，之前测序和pcr 鉴定正确，但是到了诱导表达的时候出了问题，正常情况取1－2ml 的菌制样，跑SDS PAGE 能看到明显的一条目的蛋白大小的条带，但是我的需要10ml的菌液离心下来菌，制样才能看到那个明显的条带。请问，有人能帮我分析分析么？（新人第一次发帖，在此谢过各路大神）图片的话，需要我就拷贝上传 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有51人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
781055707
木虫 (著名写手)
- 应助: 291 (大学生)
- 金币: 3118.2
- 散金: 46
- 红花: 19
- 帖子: 2030
- 在线: 579.3小时
- 虫号: 3046113
- 注册: 2014-03-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
，我这有PET28A和PGEX-4T-1的质粒，和BL21，DH5A的感受态，你要的话，也能给你些，谢谢。 
12楼2016-03-18 10:03:26
2楼2016-03-06 19:41:24
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
楼主是先取了1～2毫升没有检测到目的条带么，建议还是上图吧，不知道你摇瓶菌体诱导后的生长情况，诱导温度是多少？当然不同的蛋白表达情况也是不一样的，至少你还可以看到目的条带 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-03-06 19:48:34
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
楼主的意思是诱导表达量太少了所以才需要10ml菌液吗？ 可以试试把样品分成胞内蛋白、细胞碎片以及全细胞三个样品一起跑PAGE，看看是不是不可溶蛋白。 如果是可溶蛋白，那就要探究一下诱导的各个条件有没有问题了。 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2016-03-07 00:15:38