| 查看: 705 | 回复: 10 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
酶切后没有目的带 已有1人参与
|
|||
|
cd40-t18用BamH1和Bsa1大酶切后，跑胶完全没有目的带，为什么？只有载体片段，没有目的基因片断？ 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有262人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 质粒pcr为阳性，但酶切没有出现目的片段
已经有2人回复
- （基因克隆）双酶切结果与目的条带大小不一致，求有经验的人帮帮我。
已经有4人回复
- 重组质粒 双酶切鉴定 条带大小问题
已经有3人回复
- 关于双酶切后连接转化，酶切验证切不开。
已经有6人回复
- 质粒重组后双酶切没有条带，求大神帮忙分析一下
已经有1人回复
- 双酶切后，跑电泳，有载体的条带，可是没有目的条带。
已经有1人回复
- 质粒提取后进行双酶切无目的基因
已经有13人回复
- 测序正确，但是酶切没有条带，而且重组质粒位置不对
已经有3人回复
- PET28a重组质粒酶切后有三条？
已经有10人回复
- 重组质粒双酶切后没有条带
已经有20人回复
- 大神救命！！！菌液PCR 出来酶切质粒没有目的条带
已经有5人回复
- 载体双酶切回收目的条带
已经有11人回复
- 重组质粒酶切验证没有目的条带
已经有7人回复
- 提取重组质粒进行双酶切之后什么条带也没有，怎么回事？？
已经有7人回复
- 载体连接后导入细菌，PCR有条带，双酶切没有，这是肿么了？
已经有6人回复
- 双酶切后转化
已经有7人回复
- 双酶切后切胶回收
已经有34人回复
- 双酶切后目的条带很淡，回收不到
已经有15人回复
- 目的基因片段胶回收后酶切，然后再跑胶后发现条带很弱，怎么改进（求助）
已经有8人回复
- 双酶切连TA后切不开
已经有13人回复
- 酶切酶连转化
已经有11人回复
- 酶切问题
已经有8人回复
- 质粒酶切后消失了
已经有11人回复
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
额，都是问号，到底是什么条带都没有，还是只有载体条带呢？首先，你这是挑的克隆子在做验证么，没有目的片段不就是阴性克隆么，重新挑取转化子验证。其次，可以结合pcr的方法来辅助酶切结果，如果是质粒浓度低导致检测不到，则pcr相对更灵敏些，如果pcr验证正确，那基本就是你质粒抽提的问题了，祝好！ 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-03-06 09:19:54
jackyoung
新虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 3507.7
- 散金: 60
- 红花: 23
- 帖子: 670
- 在线: 91.7小时
- 虫号: 799178
- 注册: 2009-06-26
- 性别: GG
- 专业: 园艺学与植物营养学
2楼2016-03-06 09:10:18
3楼2016-03-06 09:12:37
|
是这样的，我用连接了T18载体的目的基因，做转化，测序正确。然后提的质粒，然后进行酶切，先用BamH1再用bsa1，跑胶之后胶回收，做了4次，要么只有目的带，要么只有载体带，要么都有，但是目的带很浅，根本回收不回来，到底什么原因，酶切体系错了还是说酶切量不够，都解释不通呢 发自小木虫IOS客户端 |
5楼2016-03-06 21:33:40