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吕木木新虫 (小有名气)
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PCR程序 已有2人参与
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我要克隆1900bp的片段,用的GXL酶,反应体系是:模板1微升,5×GXL Buffer5微升,MIXdNTP 2微升,引物1微升,酶0.5微升,ddH2O至25微升。 对应程序:94℃30 s,72℃ 2 min,5 个循环;94℃ 30 s,(温度梯度)70℃ 40 s, 72℃ 2 min,5 个循环;94℃ 30 s,(温度梯度)68℃ 40 s,72℃ 2 min,30 个循环;72℃ 10 min,4℃保存,但是一直跑不出来,什么条带都没有,跑了一个学期了,请问怎么修改程序或体系,温度梯度怎么设置? |
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吕木木
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5楼2016-03-05 22:10:19
2楼2016-03-05 21:22:16
sandycool
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3楼2016-03-05 21:58:48
sandycool
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