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吕木木新虫 (小有名气)
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PCR程序 已有2人参与
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我要克隆1900bp的片段，用的GXL酶，反应体系是：模板1微升，5×GXL Buffer5微升，MIXdNTP 2微升，引物1微升，酶0.5微升，ddH2O至25微升。 对应程序：94℃30 s，72℃ 2 min，5 个循环；94℃ 30 s，（温度梯度）70℃ 40 s， 72℃ 2 min，5 个循环；94℃ 30 s，（温度梯度）68℃ 40 s，72℃ 2 min，30 个循环；72℃ 10 min，4℃保存，但是一直跑不出来，什么条带都没有，跑了一个学期了，请问怎么修改程序或体系，温度梯度怎么设置？ |
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吕木木
新虫 (小有名气)
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恩我也是一直在做温度梯度，一直没跑出来，不知道怎么回事，最近重提RNA，跑内参一直跑不出来，RNA没问题，而且用以前跑出来的样做对照都没跑出来，引物二聚体都没有，引物，试剂都换了结果都一样，不知道问题出在哪 发自小木虫Android客户端 |
16楼2016-03-06 13:38:45
2楼2016-03-05 21:22:16
sandycool
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3楼2016-03-05 21:58:48
sandycool
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4楼2016-03-05 22:01:27