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sandycool

铁虫 (正式写手)

[求助] 请教RNA反转录成cDNA,用于克隆和表达,选用哪个试剂盒比较好啊?

请问,用植物组织的RNA反转录成cDNA,然后特异性引物进行扩增目的片段,电泳、切胶、回收等…………,反转录这一步我买的是Takara的PrimeScript(TM) II 1st Strand cDNA Synthesis Kit,这一款试剂盒。但是据说反转录的cDNA有基因组DNA,会不会影响后续的实验,大家都是用的哪个反转录试剂盒呢?

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yvonne9044

新虫 (正式写手)

我好像就用的你说的这个试剂盒,不知道你听谁说的,一千多的东西怎么会这么没用

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2楼2016-03-04 19:48:40
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sandycool

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yvonne9044 at 2016-03-04 19:48:40
我好像就用的你说的这个试剂盒,不知道你听谁说的,一千多的东西怎么会这么没用

请问您也是做的克隆么?麻烦您确认一下您用的是不是这个试剂盒?

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3楼2016-03-04 19:50:02
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sandycool

铁虫 (正式写手)

4楼2016-03-04 20:24:05
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sandycool

铁虫 (正式写手)

准备用这一款反转录试剂盒,不知道效果怎么样,自顶

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5楼2016-03-04 20:24:52
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yvonne9044

新虫 (正式写手)

takara有三款好像,其中两款我都用过,一千二百多我记得,你看看价格对不对,我记得用过,我现在没在学校,所以没法确认,其实都能做出来,康维那个五十块钱的盒子我也反转成功过

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6楼2016-03-04 22:00:10
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youyou德华

金虫 (小有名气)

里边应该有去除基因组DNA的吧,用过天根的挺好用。只不过是做定量用的

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7楼2016-03-04 22:14:19
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sandycool

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yvonne9044 at 2016-03-04 22:00:10
takara有三款好像,其中两款我都用过,一千二百多我记得,你看看价格对不对,我记得用过,我现在没在学校,所以没法确认,其实都能做出来,康维那个五十块钱的盒子我也反转成功过
...

嗯嗯,对的。50次的确实是一千二三,但是不知道这个做反转录,不除基因组DNA会不会有影响。

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8楼2016-03-05 08:06:33
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sandycool

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by youyou德华 at 2016-03-04 22:14:19
里边应该有去除基因组DNA的吧,用过天根的挺好用。只不过是做定量用的

去除基因组DNA的不是这一款,是另外一款。这个说是只能用于荧光定量的反转录
请教RNA反转录成cDNA,用于克隆和表达,选用哪个试剂盒比较好啊?-1



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9楼2016-03-05 08:08:49
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fudan671

木虫 (著名写手)

好多都可以,
10楼2016-03-05 08:58:12
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