应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC色谱柱内径改变应该如何调整？
51/1返回列表
查看: 1498  |  回复: 9
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

花锦姑娘

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC色谱柱内径改变应该如何调整？已有5人参与

各位大神，最近用到HPLC，标准上的方法是使用3.0*150mm的C18柱子，流速为0.8mL/min。我想使用同样的流动相，但是实验室并没有这种规格的柱子，目前有4.6*150mm和4.6*250mm的柱子。我应该挑选哪一种柱子？流速需要发生改变吗？使用这种柱子会不会对保留时间和检测率发生影响呢？小白诚心求助，感谢感谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2016-03-04 10:47:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zongyuan

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.如果想达到大约的分离效果，使用长柱子，可提高流速和柱温，但要注意压力
2.如果本身方法分离度都非常好，为了节省时间，可以用短的，但是出峰会早，某些原方法能分开，短柱可能会分不开
3.这些你自己需要试

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-03-04 11:17:41
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

学术巨星

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
标准方法的填料粒度是多少，和你们自己的柱子一样吗？
现在来看用4.6*150mm就行，流速得适当调高，保留时间是会改变的。
如果怎么调整色谱条件都分离的不好，再用第二个柱子。
赞一下(2人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

花锦姑娘
2楼2016-03-04 11:17:11
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

花锦姑娘

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 学术巨星 at 2016-03-04 11:17:11
标准方法的填料粒度是多少，和你们自己的柱子一样吗？
现在来看用4.6*150mm就行，流速得适当调高，保留时间是会改变的。
如果怎么调整色谱条件都分离的不好，再用第二个柱子。

谢谢应助！
填料粒度是一样的，都是5微米。另外想请问一下，用这个柱子的话，原则上检测限会不会发生很大改变。我之前用4.6*250mm的柱子尝试过，改用1.0mL/min的流速，发现检测限要比标准上所说的差很多，没办法达到标准方法的精确度，你觉得这是偶然机器的问题，还是不可避免的？如果可以避免，又该如何避免呢？
赞一下 回复此楼
4楼2016-03-04 11:31:54
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

学术巨星

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 花锦姑娘 at 2016-03-04 11:31:54
谢谢应助！
填料粒度是一样的，都是5微米。另外想请问一下，用这个柱子的话，原则上检测限会不会发生很大改变。我之前用4.6*250mm的柱子尝试过，改用1.0mL/min的流速，发现检测限要比标准上所说的差很多，没 ...

这与诸多色谱参数有关，比如流动相、柱温、流速、色谱柱等等，所谓标准方法的色谱条件是在他那个柱子和特定仪器上优化得来了。实际测试条件改变以后，就会发生改变。你可以适当调节色谱参数，以得到适合你自己的色谱条件。
赞一下 回复此楼
5楼2016-03-04 13:17:21
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭