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提取粪便DNA已有3人参与
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改进的氯仿抽提法：提取粪便的DNA，文献中说消化液（含有20mmol/L Tris-HCL,5mmol/L EDTA,5ml 10%SDS,和0.13mg/ml Boiled RNase A）这要怎么配啊，看了许多文献都没有，哪位大牛帮俺一下！俺心累 发自小木虫Android客户端 |
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【答案】应助回帖
| 粪便首先需要预处理：粪便标本加人装有2mL无菌PBS缓冲液(0.05mol/L，pH 7.4)试管中充分振荡摇匀5～10min后3000转/分（rpm）离心5min，收集上清液，此步骤重复2次,最终收集上清液每份1ml置于1.5ml 离心管中。然后上清液12000rpm离心l0min，弃上清后，沉淀物在lmL双蒸水(ddH20)中悬置，混和后12000rpm离心5min，此步骤重复2次，收集沉淀。接下来的步骤就是用酚氯仿的抽提的方法。不过这种化学法花费时间长效果也不一定好，而且苯酚氯仿什么的有毒，用试剂盒操作就安全 简便多了，时间短，差不多半小时就可以了。常用的有凯杰QIAGEN，天根TIANGEN，百代BIODAI等 |
14楼2019-12-03 14:10:26