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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 构建质粒
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zjc0517

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以设计junction primers 进行PCR ，祝你成功！
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11楼2016-03-01 21:52:06
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轩辕漪

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
12楼2016-03-03 04:42:10
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丸子白菜

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1、两端双酶切，做好对照组。比较片段大小。200多已经很大了好吧，100bp的，都能区分开来（前提是两端有比较近的酶切位点，比如300和400，可以比较，但1300和1400就不太好区分了）
2、PCR，鉴定一下是否能引出条带，就用你之前扩增的 引物，做好对照。
3、最最准确的就是测序，这个最准了，前面俩都是参考。
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13楼2016-03-03 05:06:06
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pipi5533

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 轩辕漪 at 2016-03-03 04:42:10
看看目的片段上有没有特异的酶切位点，用载体其他位置的酶切位点，切一个比较大的片段，与空载比较，差异200bp，能看出来

那就是重新设计引物进行pcr对吧，我试试，谢谢

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14楼2016-03-03 09:15:31
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pipi5533

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 丸子白菜 at 2016-03-03 05:06:06
1、两端双酶切，做好对照组。比较片段大小。200多已经很大了好吧，100bp的，都能区分开来（前提是两端有比较近的酶切位点，比如300和400，可以比较，但1300和1400就不太好区分了）
2、PCR，鉴定一下是否能引出条带 ...

嗯嗯，谢谢

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15楼2016-03-03 09:16:48
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