我先前做了pcr片段的克隆,对阳性克隆扩大培养并提取质粒,然后跑电泳,只出现一条带。我的质粒大约5kbp。我看有资料说由于质粒构象的不同可能会出现三条带或更多。提取质粒后电泳到底会出现几条带?我这里出现了一条带正常吗? 返回小木虫查看更多
由于质粒的螺旋程度不同,显示出来的条带会有所差异,出现一到三条都是正常的
正常的,我每次提后电泳也只有一条带
一条带很正常
也有可能是不同的结构在电泳时没有分开,所以就是一条带了!!
支持一条带,想象你用的缓冲液都是一样的,之前质粒所处的保存环境也是一样的,跑出多条带的可能行我没见过,我的要么是没有,要么就是那一条。当然,如果跑得时间短,前段会有引物带的。但不是很亮。
应该是 三条吧
正常质粒是闭合的双链DNA。在电泳过程中可能使质粒发生开环,或者由开环解开螺旋变成线形。这三种形态电泳时的分离率不同,分离速度不同,分成三带。闭环(超螺旋),开环,线形的螺旋率依次降低。 所以质粒电泳时也并不一定会出现三条带,只是有可能。当然部分质粒发生变化,其量的大小也并不一定就能够检测出来。所以有可能部分发生了变化,跑出来三条,但量很少,根本就看不出来,
由于质粒的螺旋程度不同,显示出来的条带会有所差异,出现一到三条都是正常的
正常的,我每次提后电泳也只有一条带
一条带很正常
也有可能是不同的结构在电泳时没有分开,所以就是一条带了!!
支持一条带,想象你用的缓冲液都是一样的,之前质粒所处的保存环境也是一样的,跑出多条带的可能行我没见过,我的要么是没有,要么就是那一条。当然,如果跑得时间短,前段会有引物带的。但不是很亮。
应该是
三条吧
正常质粒是闭合的双链DNA。在电泳过程中可能使质粒发生开环,或者由开环解开螺旋变成线形。这三种形态电泳时的分离率不同,分离速度不同,分成三带。闭环(超螺旋),开环,线形的螺旋率依次降低。
所以质粒电泳时也并不一定会出现三条带,只是有可能。当然部分质粒发生变化,其量的大小也并不一定就能够检测出来。所以有可能部分发生了变化,跑出来三条,但量很少,根本就看不出来,