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最后发表
农林
siRNA转染后什么时候做蛋白检测(如
Western
Blot
)最好?
siRNA转染后(entranster)在mRNA水平下降后,接下来才会有蛋白水平的下降,一般来说,转染后48-72小时进行蛋白检测通常会得到较好的结果。
engreen2016
2020-04-27 02:13
生物科学
生物实验技术资源(测序、PCR、细胞学等18大技术),从入门到...
rflp8、rt-pcr9、重叠延伸pcr九、最全
western
-
blot
技术1、
western
-
blot
实验原理及操作视频2、
western
-
blot
经典文献汇总3、
western
-
blot
实验指导流程4、
western
-
blot
蛋白质印迹实验原理与...
huanbuyi45
2020-04-20 02:29
生物科学
western
-
blot
实验注意事项
滤纸、胶、膜之间的大小,一般是滤纸=膜=胶。滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡,气泡会造成短路。因为DEPF膜的疏水性,膜必须首先在甲醇中完全浸湿。而且在以后的操作中,膜也必须随时保持...
engreen2016
2020-04-07 12:51
农林
western
-
blot
化学发光(ECL)的特异性差怎么办?
1.蛋白上样量过大。可降低蛋白上样量。2.一抗是多克隆抗体,或一抗、二抗浓度太高。可更换成单克隆抗体,或降低抗体浓度,缩短抗体孵育时间,优化一抗和二抗的使用浓度。...
engreen2016
2020-04-03 07:17
食品
western
-
blot
化学发光(ECL)为什么会淬灭?
做WesternBlot发光实验经常有“淬灭”的情况发生,经常有朋友反映,加发光试剂后立刻可以看到很明显的亮光,可亮光很快就消逝了,压完片后,条带却很弱,甚至什么也没有。...
engreen2016
2020-04-03 07:03
生物科学
导致
Western
Blot
发光(ECL)“背景高”的原因有哪些?
1.抗体浓度过高,洗涤不充分,可以造成抗体在膜上的非特异结合,导致高背景。可通过降低抗体稀释度,增加洗膜次数和Buffer用量,或在WashBuffer中添加终浓度0.05%的Tween-20加以改善。...
engreen2016
2020-04-03 01:54
招聘信息布告栏
深圳技术大学-邓载安课题组招聘研究助理
4、能单独完成细胞相关的实验,如MTT、激光共聚焦、
Western
-
blot
,real-timePCR以及动物实验。5、具有良好的中英文阅读和写作能力,熟悉查阅外文资料。6、已发表SCI论文的优先考虑。邮箱:'...
ㄎㄈㄇ
2020-03-27 09:01
生物科学
如何评估体内转染实验的效率?
运用体内试剂Entranster进行体内转染实验后,针对具体的组织器官,不同的注射...一般评估效果,我们建议在分子水平,用RT-PCR,在细胞水平,用
Western
-
Blot
,在组织水平,用病理生理等方法。
engreen2016
2020-03-13 02:00
分子生物
请问
western
blot
一抗可以重复使用吗?染菌会怎样?
如题
XM学士
2020-02-25 02:24
分子生物
western
blot
内参不齐,是一抗回收效果问题还是上样量调整问题?
1.一抗的重复利用问题,我用cangetsignal的solution1稀释,0.01%叠氮化钠。原来可以重复五六次,现在只能用一次。同一张膜,用第二次的抗体结果不好,内参浓淡不一,但是再用新配的抗体染,...
XM学士
2020-02-25 02:08
分子生物
western
blot
内参不齐,是一抗回收效果不好还是上样量调整的问题...
1.一抗的重复利用问题,我用cangetsignal的solution1稀释,0.01%叠氮化钠。原来可以重复五六次,现在只能用一次。同一张膜,用第二次的抗体结果不好,内参浓淡不一,但是再用新配的抗体染,...
XM学士
2020-02-25 02:49
硕博家园
Western
blot
图分析,有偿
帮助一位来自巴铁的朋友求助分析调试一下westernblot的图,有偿。具体的可以和他聊。诶,不可以留联系方式,所以我刚被屏蔽了,站内吧[Lasteditedbytuoavrilon2020-2-3at17:08]
tuoavril
2020-02-03 05:39
转基因
植物中蛋白
Western
blot
中有其他条带是什么原因
在文献中看到对植物中某蛋白的多肽制备抗体,进行westernblot,目的条带42kD,如下图所示,在40-50kd有2个条带,下面是目的条带,在突变体,野生型和转基因中有差别,但是上面的条带不知道...
atyrye
2020-01-31 02:14
生物科学
western
-
blot
实验步骤
Western
,也称Westernblot、Westernblotting、
Western
印迹,是用抗体检测蛋白的重要方法之一。可按照以下步骤操作。1.收集蛋白样品(Proteinsamplepreparation)使用细胞裂解液,对贴壁细胞、...
人间芳菲
2020-01-07 08:46
生物科学
western
-
blot
实验的影响因素有哪些?
1.样品质量。所抽取样品的蛋白含量,蛋白变性是否充分等等,还有,蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外,蛋白样品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都会对...
人间芳菲
2020-01-06 06:14
生物科学
western
-
blot
化学发光时,出现非特异条带,该怎么办?
出现杂带或非特异条带的原因可能有以下几个方面:1.蛋白上样量过大。可降低蛋白上样量。2.一抗是多克隆抗体,或一抗、二抗浓度太高。可更换成单克隆抗体,或降低抗体浓度,缩短抗体孵育时间...
人间芳菲
2020-01-06 01:24
生物科学
新手求助
Western
Blot
分析!重金悬赏
本人WesternBlot小白,transfer之后的marker非常清晰,但是最后拍出来背景很高,不知道什么原因=每次都是TBST洗三次,每次10min。第一,二张图是看psmad2。第三,四张图是Beta-actin,标准品...
queliang
2020-01-04 09:54
生物科学
动物体内转染,如何评估不同组织的干扰效率?
运用体内试剂Entranster进行体内转染实验后,针对具体的组织器官,不同的注射...一般评估效果,我们建议在分子水平,用RT-PCR,在细胞水平,用
Western
-
Blot
,在组织水平,用病理生理等方法。
人间芳菲
2020-01-03 07:10
微生物
western
-
blot
实验关键点
1.样品质量。所抽取样品的蛋白含量,蛋白变性是否充分等等,还有,蛋白样品的ph值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外,蛋白样品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都会对...
人间芳菲
2019-12-31 08:37
分子生物
我的
western
-
blot
实验经验总结
我做了很久的WB,最大的一个难点感觉在于样品制备上!蛋白的降解有些时候是你想象不到的,可能出奇的糟糕,也可能完全没事~如果单独做WB的话,感觉以“快速彻底裂解,先变性后保存”的原则...
人间芳菲
2019-12-31 07:25
招聘信息布告栏
中国科学院大学温州研究院沈建良研究员 课题组招聘
4、具有一定的生物知识背景,能单独完成细胞相关的实验,如MTT、激光共聚焦、
western
-
blot
,PCR以及动物实验。5、具有良好的中英文阅读和写作能力,熟悉查阅外文资料。6、已发表SCI论文...
何晓俊
2019-12-30 07:41
分子生物
ECL发光液的选择
做
western
-
blot
实验时,选择一款好的发光液对实验的成功很重要,否则很容易发生各种问题,如淬灭,背景高,不灵敏,发光时间短等。比如淬灭,我觉得WesternBlot“淬灭”的原因主要在两方面...
人间芳菲
2019-12-27 07:07
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