【答案】应助回帖

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科研就是一条不归路啊

1楼2015-11-20 18:42:36

15541223321

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相思以桀: 金币+1, ★有帮助 2015-11-20 19:28:25

你的胶原是哪个型的，胶原分子量是比较大的，是疏水性的，只有水解过度成多肽的时候才变成水溶性的，不过这不是你想要的吧，，，，所以团聚是正常的，另外注意naoh调ph，一定先稀释再用，否则会变性的。。。至于酶怎么分离出来，楼主可以根据胶原分子量远大于酶分子量来分离。具体有什么手段，解决了之后麻烦分享一下，谢谢

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2楼2015-11-20 19:14:56

相思以桀

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2楼: Originally posted by 15541223321 at 2015-11-20 19:14:56
你的胶原是哪个型的，胶原分子量是比较大的，是疏水性的，只有水解过度成多肽的时候才变成水溶性的，不过这不是你想要的吧，，，，所以团聚是正常的，另外注意naoh调ph，一定先稀释再用，否则会变性的。。。至于酶怎 ...

胶原理论上应该是I型的，我之前没有用水溶，是乙酸溶解进行提取的，可是看文献中说要调节ph进行酶灭活所以才尝试的。胃蛋白酶分子量大约35000D好像，透析应该就可以除去吧。另外，你试过调ph对酶灭活吗，用的多大浓度？

科研就是一条不归路啊

3楼2015-11-20 19:28:02

15541223321

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3楼: Originally posted by 相思以桀 at 2015-11-20 19:28:02
胶原理论上应该是I型的，我之前没有用水溶，是乙酸溶解进行提取的，可是看文献中说要调节ph进行酶灭活所以才尝试的。胃蛋白酶分子量大约35000D好像，透析应该就可以除去吧。另外，你试过调ph对酶灭活吗，用的多大浓 ...

通过调ph灭活这说法是不对的，只能说抑制他的活性，不让他继续酶解了，

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4楼2015-11-20 19:31:12

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4楼: Originally posted by 15541223321 at 2015-11-20 19:31:12
通过调ph灭活这说法是不对的，只能说抑制他的活性，不让他继续酶解了，
...

能不能透析出来还得看你的透析袋能不能了

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5楼2015-11-20 19:32:01

相思以桀

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5楼: Originally posted by 15541223321 at 2015-11-20 19:32:01
能不能透析出来还得看你的透析袋能不能了
...

现在的关键不是这些理论性的东西，我想知道我调ph为什么胶原聚集了，而文献中却都在说用氢氧化钠调ph到10，然后他们还能继续离心啊，盐析啊这些步骤

科研就是一条不归路啊

6楼2015-11-20 19:43:18

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6楼: Originally posted by 相思以桀 at 2015-11-20 19:43:18
现在的关键不是这些理论性的东西，我想知道我调ph为什么胶原聚集了，而文献中却都在说用氢氧化钠调ph到10，然后他们还能继续离心啊，盐析啊这些步骤

...

胶原溶于酸，不易溶于水

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7楼2015-11-20 19:45:25

相思以桀

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7楼: Originally posted by 15541223321 at 2015-11-20 19:45:25
胶原溶于酸，不易溶于水
...

这个我当然知道，我不是第一次提胶原，但是之前没进行过酶灭活这一步，所以这一步我很不了解

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科研就是一条不归路啊

8楼2015-11-20 21:47:49

南窗隐者

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相思以桀: 金币+2, ★有帮助 2015-11-22 10:14:40

我也在用胶原溶液调pH，期间也出现过团聚的情况，应该是到等电点的缘故吧，若远离等电点还是会重新溶解的，你可以快速加入碱，直接绕过等电点就不会出现团聚了。

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在知识的海洋里任我飘荡

9楼2015-11-22 00:21:28

相思以桀

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9楼: Originally posted by 南窗隐者 at 2015-11-22 00:21:28
我也在用胶原溶液调pH，期间也出现过团聚的情况，应该是到等电点的缘故吧，若远离等电点还是会重新溶解的，你可以快速加入碱，直接绕过等电点就不会出现团聚了。

快速加入？我看文献中人家都说缓慢加入呀……而且我想知道这跟氢氧化钠浓度有没有关系？

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科研就是一条不归路啊

10楼2015-11-22 10:14:15