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《RNA生物化学手册》2015wiley重磅书籍
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书名Handbook of RNA Biochemistry 作者Roland K. Hartmann, Albrecht Bindereif, Astrid Sch¨on, and Eric Westhof 页数1371 Print ISBN: 978-3-527-32776-8 ePDF ISBN: 978-3-527-65055-2 ePub ISBN: 978-3-527-65054-5 mobi ISBN: 978-3-527-65053-8 oBook ISBN: 978-3-527-64706-4 出版社 wiley Contents Preface XXXV List of Contributors XXXVII Part I RNA Synthesis and Detection 1 1 Enzymatic RNA Synthesis Using Bacteriophage T7 RNA Polymerase 3 Markus G¨oßringer, Dominik Helmecke, Karen K¨ohler, Astrid Sch¨on, Leif A. Kirsebom, Albrecht Bindereif, and Roland K. Hartmann 1.1 Introduction 3 1.2 Description of Method – T7 Transcription In vitro 4 1.2.1 Templates 4 1.2.1.1 Strategy (i): Insertion into a Plasmid 4 1.2.1.2 Strategy (ii): Direct Use of Templates Generated by PCR 5 1.2.1.3 Strategy (iii): Annealing of a T7 Promoter DNA Oligonucleotide to a Single-Stranded Template 5 1.2.2 Special Demands on the RNA Product 5 1.2.2.1 Homogeneous 5 and 3 Ends, Small RNAs, Functional Groups at the 5 End 5 1.2.2.2 Modified Substrates 6 1.3 Transcription Protocols 8 1.3.1 Transcription with Unmodified Nucleotides 9 1.3.2 Transcription with 2-Fluoro-Modified Nucleotides 16 1.3.3 T7 Transcripts with 5-Cap Structures 17 1.3.4 Purification 18 1.4 Troubleshooting 20 1.4.1 Low or No Product Yield 20 1.5 Rapid Preparation of T7 RNA Polymerase 21 1.5.1 Required Material 21 1.5.1.1 Medium 21 1.5.1.2 Buffers and Solutions 21 1.5.1.3 Electrophoresis and Chromatography 22 1.5.2 Procedure 22 1.5.2.1 Cell Growth, Induction, and Test for Expression of T7 RNAP 22  QQ截图20150425220017.jpg |
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