【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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李小同

木虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 灵洛1991 at 2015-04-19 23:31:49
可是转染细胞,不是需要纯化后的Bacmid么,如果直接手提的上细胞sf9会不会有问题呢,大侠小弟很是困惑求解...

没有任何问题,我们都是这样做的,手提的不比试剂盒的差,SF9也不是娇贵的细胞,转染很容易的
11楼2015-04-20 14:29:31
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布施禅定

银虫 (初入文坛)

同学,请问PCR鉴定成功了吗?我现在碰到了和你一样的问题,想知道你怎么解决的?谢谢!
12楼2015-06-02 14:28:48
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布施禅定

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 马海云 at 2015-03-27 13:13:53
我是先PCR验证过后,再提取杆粒的   确实是换了酶以后就P出来了,你试试看...

你好,请问你后来换的什么酶就可以P出来了?
13楼2015-06-02 14:33:07
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燕子1314

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 马海云 at 2015-03-25 08:55:39
我之前做也是,一次性挑50个全是300,重新组了一遍,PCR换用了LA taq,结果就出来了  你试试要不

我p出来有好几条带,也有我的目的片段 ,我下一步应该怎么办
14楼2015-09-05 10:15:56
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马海云

金虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 布施禅定 at 2015-06-02 14:33:07
你好,请问你后来换的什么酶就可以P出来了?...

La Taq

发自小木虫Android客户端
15楼2015-09-06 06:44:31
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马海云

金虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 燕子1314 at 2015-09-05 10:15:56
我p出来有好几条带,也有我的目的片段 ,我下一步应该怎么办...

好几条带?是有一条300左右吧?

发自小木虫Android客户端
16楼2015-09-06 06:45:48
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燕子1314

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 马海云 at 2015-09-06 06:45:48
好几条带?是有一条300左右吧?
...

恩   没有300bp,   有750bp,2000bp
17楼2015-09-14 11:33:00
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燕子1314

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 马海云 at 2015-09-06 06:45:48
好几条带?是有一条300左右吧?
...

附件有图
使用Bac-to-Bac表达系统构建的重组穿梭质粒pFast-Bac导入到DH10Bac时总是失败。
20150825shai.JPG

18楼2015-09-14 11:35:08
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dalian0725

新虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by 燕子1314 at 2015-09-14 11:35:08
附件有图

20150825shai.JPG
...

我也是做昆虫表达的,你现在这个问题解决没?快做到转染sf9细胞没?如果做到了 我想问你这方面的问题
19楼2015-11-18 21:26:45
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燕子1314

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
19楼: Originally posted by dalian0725 at 2015-11-18 21:26:45
我也是做昆虫表达的,你现在这个问题解决没?快做到转染sf9细胞没?如果做到了 我想问你这方面的问题...

解决了,已经筛出来了
20楼2015-11-19 08:19:20
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