| 查看: 1416 | 回复: 5 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者蓝默儿将赠送您 2 个金币 | ||
蓝默儿金虫 (小有名气)
|
[求助]
ELISA空白值过高已有2人参与
|
|
| 进行的是夹心ELISA，用多抗做包被抗体，抗原为原核表达的蛋白，之后加酶标单抗。空白对照孔是不加抗原，加的是PBS，其它相同。 |
回复此楼» 猜你喜欢
想问一下有没有需要文章但是没时间带学生的研究生导师。
已经有18人回复
-
颜宁:基础研究应顶天立地,立地即从需求端作为问题的出发点,立项背景就是面向真实需求
已经有3人回复
-
发现督导在听课，需要跟TA招呼示意吗？有同学看手机、课件有疏漏算大问题吗？
已经有4人回复
-
催稿后秒拒
已经有6人回复
-
前同事拿我以前未中的国自然标书申请今年的国自然，现在基金委发来调查函
已经有10人回复
-
298求调剂
已经有9人回复
-
申请省自然科学基金，研究区能否是省外区域
已经有13人回复
-
国内科研环境差导致国内科研水平差的根源
已经有3人回复
-
CSC在职申请求问
已经有7人回复
-
家乡二本高校/沿海传统私企，如何抉择？
已经有15人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- ELISA空白值在0.05-0.08正常吗？
已经有4人回复
- 纳氏试剂比色法测氨氮空白（非标准曲线里的空白）过高的问题
已经有5人回复
- 做总磷空白值高
已经有9人回复
- 双抗夹心ELISA 空白值偏高
已经有3人回复
- ELISA 显色液空白OD偏高，P/N偏小，是否可以每孔OD减去显色液对照的值?
已经有5人回复
- 【求助/交流】双抗体夹心ELISA的空白孔该怎么设置？
已经有6人回复
antibodyknow
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 306.6
- 红花: 3
- 帖子: 24
- 在线: 11.7小时
- 虫号: 3131806
- 注册: 2014-04-12
- 专业: 抗体工程学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
蓝默儿: 金币+3, ★有帮助 2014-05-23 09:43:10
感谢参与，应助指数 +1
蓝默儿: 金币+3, ★有帮助 2014-05-23 09:43:10
|
两种可能： 1.你的包被用的多抗与酶标单抗之间有交叉反应。检查一下你的多抗是哪种多抗：鼠多抗，兔多抗还是羊多抗？你的酶标单抗与多抗最好是同一种来源。多抗做包被抗体本身就不是一个好选择，容易出现交叉反应，导致背景高。 2.你的整个ELISA过程是否封闭、洗涤充分。建议在所用的封闭和洗涤buffer中加Tween20至0.1%，减少非特异性结合。 3.建议做一个完全空白对照，即包被时用PBS，封闭环节正常，样品用PBS，然后正常加酶标二抗。可以初步判断你的ELISA系统是否正常，进而可以判断出你的多抗和二抗间是否有交叉反应。 祝好运！ |
2楼2014-05-22 22:37:00
蓝默儿
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1281.8
- 散金: 19
- 帖子: 80
- 在线: 88.4小时
- 虫号: 1695664
- 注册: 2012-03-16
- 性别: MM
- 专业: 兽医传染病学
3楼2014-05-23 09:44:53
4楼2014-05-23 19:39:33
5楼2016-12-23 13:41:46
Qq16
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 65.9
- 帖子: 27
- 在线: 4.7小时
- 虫号: 16080840
- 注册: 2019-08-21
- 性别: MM
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
6楼2019-09-20 15:08:24
90