【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
查看: 2540  |  回复: 10

李战士

木虫 (正式写手)

[求助] 蛋白水解多肽样品游离氨基酸的测定

动物蛋白水解得到的多肽样品,想进行游离氨基酸的测定,使用蛋白质沉淀剂(如三氯乙酸)可能除去不掉小分子的肽类,进而会影响游离氨基酸的测定。请问大家有没有什么好方法,谢谢!
回复此楼
其实有很多事我们都知道,只是不愿意说出来
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

fengling5188

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hsd3521: 回帖置顶 2012-07-17 20:11:25
李战士: 金币+15, ★★★★★最佳答案 2012-07-18 00:19:03
磷钨酸(PTA)是一种极有辨别力的蛋白质沉淀剂,除氨基二羧酸外,所有的游离氨基酸都可在5 % PTA中溶解,但分子量大于600 DA的肽类则被沉淀出来。5 % PTA经常用在干酪中,想必在蛋白水解液中也可以使用。仅供参考下...
3楼2012-07-17 19:12:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
李战士: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢栋哥! 2012-07-18 00:19:17
HPLC-MS可以不?
或者双向电泳。。
太胖了!~
2楼2012-07-16 23:22:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李战士

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fengling5188 at 2012-07-17 19:12:55
磷钨酸(PTA)是一种极有辨别力的蛋白质沉淀剂,除氨基二羧酸外,所有的游离氨基酸都可在5 % PTA中溶解,但分子量大于600 DA的肽类则被沉淀出来。5 % PTA经常用在干酪中,想必在蛋白水解液中也可以使用。仅供参考下 ...

非常感谢!那这个磷钨酸应该如何除去呢?它的存在应该会影响氨基酸分析仪测定吧,正常是用0.02MHCl溶解的。
其实有很多事我们都知道,只是不愿意说出来
4楼2012-07-18 14:56:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengling5188

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 李战士 at 2012-07-18 14:56:09
非常感谢!那这个磷钨酸应该如何除去呢?它的存在应该会影响氨基酸分析仪测定吧,正常是用0.02MHCl溶解的。...

常见用磷钨酸沉淀后,取上清液进行凯氏定氮,测其总游离氨基酸量。不知道其能否用于氨基酸分析仪测定种类。不过,文献中常用三氯乙酸沉淀后,用氨基酸分析仪测定,我也不太明白为什么。
5楼2012-07-19 08:58:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李战士

木虫 (正式写手)


hsd3521: 金币+1, 加油,走下液质连用不行吗? 2012-07-20 21:13:47
引用回帖:
5楼: Originally posted by fengling5188 at 2012-07-19 08:58:39
常见用磷钨酸沉淀后,取上清液进行凯氏定氮,测其总游离氨基酸量。不知道其能否用于氨基酸分析仪测定种类。不过,文献中常用三氯乙酸沉淀后,用氨基酸分析仪测定,我也不太明白为什么。...

氨基酸分析仪通常分为两种系统:蛋白水解分析系统(钠盐系统)和游离氨基酸分析系统(锂盐系统),我们现在想用前一个系统来测游离氨基酸,这个系统除了氨基酸最好只能有盐酸存在(后一个系统现在用不了,囧)。三氯乙酸处理沉淀蛋白后,我看有文献用的是HPLC测定的,用氨基酸分析仪我也确定不了了。。。
谢谢!!!
其实有很多事我们都知道,只是不愿意说出来
6楼2012-07-19 15:43:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘渺尘埃

木虫 (小有名气)

楼主做完实验应该好久了吧,我想请教一下楼主您的做的动物蛋白水解,在水解之前是如何去脂肪的,动物蛋白水解之前需要什么样的前处理吗?
成功需要的条件很多,你我只需在一个条件下努力前行
7楼2013-09-25 14:19:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李战士

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 飘渺尘埃 at 2013-09-25 14:19:51
楼主做完实验应该好久了吧,我想请教一下楼主您的做的动物蛋白水解,在水解之前是如何去脂肪的,动物蛋白水解之前需要什么样的前处理吗?

我的那个蛋白没有脂肪,不好一起啊。

[ 发自小木虫客户端 ]
其实有很多事我们都知道,只是不愿意说出来
8楼2013-09-26 12:40:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李战士

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 飘渺尘埃 at 2013-09-25 14:19:51
楼主做完实验应该好久了吧,我想请教一下楼主您的做的动物蛋白水解,在水解之前是如何去脂肪的,动物蛋白水解之前需要什么样的前处理吗?

我的那个蛋白没有脂肪,不好意思啊。

[ 发自小木虫客户端 ]
其实有很多事我们都知道,只是不愿意说出来
9楼2013-09-26 12:41:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘渺尘埃

木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 李战士 at 2013-09-26 12:41:16
我的那个蛋白没有脂肪,不好意思啊。
...

这样啊,没有不好意思的呵呵
成功需要的条件很多,你我只需在一个条件下努力前行
10楼2013-09-26 14:11:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 李战士 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 期末给学生划重点都是什么话术啊 +4 luokereng 2024-04-20 4/200 2024-04-20 08:47 by tiger_galaxy
[找工作] 杭州国企和浙江高校如何选择? +16 restart2024 2024-04-15 22/1100 2024-04-20 07:31 by likeac
[找工作] 家乡二本高校/沿海传统私企,如何抉择? 10+6 化学巷 2024-04-15 15/750 2024-04-19 20:43 by jiayouqf7
[硕博家园] +5 s150535912 2024-04-18 6/300 2024-04-19 20:33 by s150535912
[考研] 考研英语带学 +6 choice666 2024-04-18 6/300 2024-04-19 17:46 by charles-c
[基金申请] 估计今年青基又没戏 +9 忆念7 2024-04-18 9/450 2024-04-19 17:01 by 顺其zi然
[基金申请] 院士建议:对勇于提出解决卡脖子问题新解决方案的学者加大资助力度 +7 zju2000 2024-04-16 10/500 2024-04-19 11:10 by dwuab
[论文投稿] 发个文章,结果被某学报请的外审PUA了 +3 ziniu168 2024-04-18 8/400 2024-04-18 21:40 by xli1984
[博后之家] 博后进站年龄可以超过35岁? +8 suesong0818 2024-04-14 8/400 2024-04-18 08:38 by charles-c
[考研] 求调剂化工学硕276 +14 星星陨落 2024-04-13 14/700 2024-04-17 22:57 by 华北刘兵
[基金申请] 请问教育部人文社科难度大吗 +9 锦衣卫寒战 2024-04-15 14/700 2024-04-16 23:10 by 锦衣卫寒战
[考研] 347求调剂 +3 寒辰ovo 2024-04-15 7/350 2024-04-16 19:05 by 寒辰ovo
[考研] 312求调剂 +3 Lauhalo 2024-04-15 3/150 2024-04-16 10:16 by 19862091
[考研] 296求调剂 +3 Cclocomotive 2024-04-16 4/200 2024-04-16 10:04 by 19862091
[考研] 求调剂 +4 桃岸雪 2024-04-15 5/250 2024-04-15 18:49 by mthwyj
[有机交流] 求乙二醇检测方法 13+3 YaShang 2024-04-14 4/200 2024-04-15 15:16 by Byltest
[考研] 材料与化工267求调剂 +5 工科材料267 2024-04-15 8/400 2024-04-15 14:11 by wyx颖颖
[考研] 278求调剂 +4 月亮就蒜 2024-04-13 5/250 2024-04-14 23:03 by 永字号
[考研] 290求调剂 +3 杨yhr 2024-04-14 5/250 2024-04-14 21:50 by coco1981
[考研] 086000生医没考数学304分,一志愿西农求调剂 +3 王有田有学上 2024-04-13 5/250 2024-04-13 16:18 by coco1981
信息提示
请填处理意见