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haiwoshishui

木虫 (正式写手)

[交流] 膜蛋白表达问题已有7人参与

最近克隆到一个膜蛋白的基因,准备做个表达。听好多人说膜蛋白形成包涵体之类的,不甚了解这一块,不知道做原核表达好还是真核表达好,正在纠结。求个大仙帮忙解说下。3QQQQQ!
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imyting

至尊木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
膜蛋白疏水性一般比较强,原核表达很容易形成包涵体的,至于真核表达体系,没做过
悠哉游哉做实验,成兮败兮我随便
2楼2012-06-08 09:03:41
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ivyvampire

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
膜蛋白是从哪里克隆出来的,膜蛋白不好表达就是了
3楼2012-06-08 13:19:23
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haiwoshishui

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ivyvampire at 2012-06-08 13:19:23
膜蛋白是从哪里克隆出来的,膜蛋白不好表达就是了

是从真菌中克隆出来的,想着做结晶呢。
4楼2012-06-08 15:51:32
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sevenlalala

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们实验室正在做原核的膜蛋白,表达在大肠里,表达出来了,不是包涵体
5楼2012-07-27 09:32:33
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haiwoshishui

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by sevenlalala at 2012-07-27 09:32:33
我们实验室正在做原核的膜蛋白,表达在大肠里,表达出来了,不是包涵体

求指教!!
6楼2012-07-27 10:28:45
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hellolin

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by sevenlalala at 2012-07-27 09:32:33
我们实验室正在做原核的膜蛋白,表达在大肠里,表达出来了,不是包涵体

求指教,用的什么载体,菌株之类的,还有诱导条件。谢谢
scienceguy
7楼2012-09-23 10:32:28
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sevenlalala

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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7楼: Originally posted by hellolin at 2012-09-23 10:32:28
求指教,用的什么载体,菌株之类的,还有诱导条件。谢谢...

用的好像是pTrc质粒,表达的蓝藻的一个膜蛋白,就用0.5mM的IPTG诱导
8楼2012-09-23 17:55:57
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20083630zhan

木虫 (正式写手)

请问一下,你的膜蛋白是怎样克隆的啊?谢谢了,最近一直没有做出来
9楼2013-01-20 17:14:21
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sunbeartao

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by sevenlalala at 2012-07-27 09:32:33
我们实验室正在做原核的膜蛋白,表达在大肠里,表达出来了,不是包涵体

请教下,膜蛋白在大肠中表达出来后还是在大肠的膜上的吗?
22
10楼2013-07-04 15:24:10
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