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qiukq1989

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 纳米金胶离心后加缓冲液聚沉,请问应该怎么解决???已有1人参与

用柠檬酸钠还原了氯金酸得到了10nm的纳米金,接着用氢氧化钠溶液调节pH=11,加入过量6-巯基己酸(乙醇溶),搅拌16个小时,然后离心,离心的转速为7000r/min,10℃,30min,将上清液全吸走,加入缓冲液(5mM Tris,50mM NaCl,pH=7.2),将沉淀分散后很快就变紫团聚了,问题出在了哪里呢?需要老化什么的吗?我是参考Colorimetric and luminescent bifunctional Ru(II) complex-modified gold nano probe for sensing of DNA这篇文献的,求解答!!!很快就要交本科毕业论文了,不解决这个问题没法做性质实验测试,就没有数据写论文。。。。。。。。求各路大侠帮忙救急!!!
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yunfei120

木虫 (小有名气)

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qiukq1989: 金币+2, 有帮助 2012-04-21 21:12:52
问题出在加入了50mM的NaCl,我做纳米金这方面的,除了DNA修饰的纳米金能稳定存在0.05M以上的盐浓度外,其它很少能稳定,大多数会聚沉,可以先把盐浓度降低些分散,你试水分散肯定可以的。
8楼2012-04-21 20:56:11
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桃子妖妖

铜虫 (小有名气)

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qiukq1989: 金币+2, 有帮助 2012-04-23 20:11:59
我们也是用柠檬酸钠还原的氯金酸,得到10nm左右的金的话,离心转速是14000r/min(eppendorf 5417R),20min左右,离心之后加入柠檬酸钠。加入乙醇,或者盐很容易变紫团聚。如果你确定你的实验没有问题(我是指你加的那些缓冲溶液之类的,因为我们还没有做和生物相关的), 你可以试试改变一下离心转速和时间。我们有时候也会出现你说的情况,但是改变一下时间或者转速就好了!
13楼2012-04-23 10:22:12
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普通回帖

zdy1398

银虫 (正式写手)

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qiukq1989: 金币+2, 有帮助 2012-04-21 18:21:55
楼主都没有师兄师姐带的吗?你的缓冲液很可能有问题,你拿清水复溶试试,如果还是聚集,则离心时间降为10min,如果还是聚集,则就是前面的问题,你一步一步排除试试
最后一直排除到合成步骤
2楼2012-04-21 08:39:16
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zihua886

木虫 (正式写手)

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qiukq1989: 金币+2, 有帮助 2012-04-21 18:22:19
先按楼上说的用水试试看沉否,如果沉的话就是巯基乙酸修饰的问题 如果不沉就是缓冲溶液的问题  但是可以肯定的说不是离心转速的问题。具体的说,如果用水分散不沉的话 先考虑缓冲溶液的浓度,如果降低浓度都不行的话就换个缓冲体系;如果用水溶也沉的话,试试离心两次,还不行的话考虑是不是羧基的问题 能不能换成比羧基电离常数更大的基团
工作原因,暂离数月。
3楼2012-04-21 10:13:48
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refnew

专家顾问 (知名作家)


【答案】应助回帖


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qiukq1989: 金币+1 2012-04-21 18:22:26
缓冲溶液相当于加入了离子,不聚集就不正常了
4楼2012-04-21 10:27:38
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qiukq1989

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zdy1398 at 2012-04-21 08:39:16:
楼主都没有师兄师姐带的吗?你的缓冲液很可能有问题,你拿清水复溶试试,如果还是聚集,则离心时间降为10min,如果还是聚集,则就是前面的问题,你一步一步排除试试
最后一直排除到合成步骤

用水可以复溶的,我实验室没做过纳米金,所以没人带
5楼2012-04-21 18:05:28
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qiukq1989

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zihua886 at 2012-04-21 10:13:48:
先按楼上说的用水试试看沉否,如果沉的话就是巯基乙酸修饰的问题 如果不沉就是缓冲溶液的问题  但是可以肯定的说不是离心转速的问题。具体的说,如果用水分散不沉的话 先考虑缓冲溶液的浓度,如果降低浓度都不行的 ...

用水不会沉的。。。。我这个东西是准备拿来检测DNA的,对于缓冲液我一直很纠结,我试过没加NaCl的Tris缓冲溶液,这个可以恢复的很好,但是文献上有氯化钠的完全没问题,做生物实验缓冲液没有氯化钠液也说不过去,而且有人的NaCl浓度达到0.3mM的,所以一直没考虑换缓冲体系。
6楼2012-04-21 18:19:42
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qiukq1989

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by refnew at 2012-04-21 10:27:38:
缓冲溶液相当于加入了离子,不聚集就不正常了

是啊,我也觉得啊,但是文献就在那里,我能说什么呢。。。。
7楼2012-04-21 18:21:22
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qiukq1989

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by yunfei120 at 2012-04-21 20:56:11:
问题出在加入了50mM的NaCl,我做纳米金这方面的,除了DNA修饰的纳米金能稳定存在0.05M以上的盐浓度外,其它很少能稳定,大多数会聚沉,可以先把盐浓度降低些分散,你试水分散肯定可以的。

嗯,好的!谢谢哈,我明天试一下!
9楼2012-04-21 21:12:33
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markar

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qiukq1989: 金币+1, 有帮助 2012-04-22 00:28:34
不离心的金纳米粒子你加入缓冲溶液的话都会聚沉的,更何况是离心后?
缓冲溶液中有离子,加入后改变了溶液中的粒子强度,必然会聚沉!
不过我目前用到的一种缓冲溶液是不会使金纳米粒子聚沉,就是硼酸硼砂缓冲溶液,不过不知道能不能调节到你要求的那个pH值!
宠辱不惊,闲看庭前花开花落;去留无意,漫随天外云卷云舒!
10楼2012-04-21 21:30:15
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