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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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xan36

新虫 (小有名气)

[求助] 请问血清RNA怎样提取？又怎样验证已提取出血清RNA？已有7人参与

如题：请问血清RNA怎样提取？又怎样验证已提取出血清RNA？
谢谢！！
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风雨后的阳光更珍贵
1楼2011-11-17 15:43:53
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

做RT-PCR或者RT-qPCR验证，记得做个灭活MMLV对照（得是阴性）证明扩出来的不是DNA
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核酸提取与Taqman诊断
20楼2020-03-06 11:30:47
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longrna

新虫 (正式写手)
有多大体积的血清？什么物种？提到后续实验做什么？要多少ng RNA？有什么特殊要求？
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伟大航线....
2楼2011-11-17 16:12:26
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xan36

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by longrna at 2011-11-17 16:12:26:
有多大体积的血清？什么物种？提到后续实验做什么？要多少ng RNA？有什么特殊要求？

有1ml左右的血清，是正常人的，想验证下血清中有没有我所要的目的基因，想提出来后做个PCR，要求的话符合PCR扩增的要求就可
谢谢！
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风雨后的阳光更珍贵
3楼2011-11-18 08:32:30
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longrna

新虫 (正式写手)
★ ★
wanhscn(金币+2): good!鼓励交流! 2011-11-19 18:31:46
人血液（全血，也就医学上说的外周血）中RNA的含量很低，1ml一般在3ug左右（1-7ug）。一般是处理抗凝血液。
像以上全血的RNA提取有两种思路：
1）直接处理抗凝的全血，即加入如Trizol的裂解液直接往下做。此方法有个缺点：处理的体积血液体积有限，一般1ml Trizol处理100ul血液，最多不超过200ul.
2) 先去除血液中的红细胞分离出其中的白细胞（即淋巴细胞），然后提取白细胞的RNA。此方法的缺点：只能提取得到淋巴细胞的RNA，血液中游离的如病毒RNA无法提得。

你的血清是直接离心分离的吗?  如果只是做PCR，估计你直接弄200ul加Trizol提取就可以了。如果不行再从长计议。。。


血液是很复杂的。。。
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伟大航线....
4楼2011-11-18 09:52:38
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