应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜     石溪大学接受考研调剂申请>

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » BCA求标准曲线（用过Pierce的BCA试剂盒的最好）
【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
131/1返回列表
查看: 2219  |  回复: 12
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 athenawj 的 5 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会

athenawj

新虫 (初入文坛)

[交流] BCA求标准曲线（用过Pierce的BCA试剂盒的最好）

我用的是Pierce的BCA试剂盒，工作液A:B=50:1,200ul工作液加10微升不同浓度的BSA标准蛋白液（0.25,0.5,0.75,1.0,1.5,2.0mg/ml），因为建议稀释BSA时用与蛋白相同的溶液，就用了试剂盒中的的bufferA(细胞核和胞质蛋白提取试剂盒 )。得到的A562值分别为0.2934,0.6408,1.0168,1.1933,1.8290,2.2797
得到标准曲线y = 1.152x + 0.048
不过我怎么感觉不太对劲，那平常师姐测得蛋白562值0.3-0.5之间，岂不是浓度很小，也就是浓度小于0.5mg/ml
请问这样的曲线合适吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼2011-09-19 09:40:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

elyn-yu

木虫 (初入文坛)
你用该还要加一个蛋白浓度为0的标准品，再做标准曲线。而且每次标准曲线不一定是一样的，总有不同。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-09-20 08:43:26
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

athenawj

新虫 (初入文坛)
自己顶一下
回复此楼
2楼2011-09-19 20:06:49
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elyn-yu

木虫 (初入文坛)
★ ★ ★
athenawj(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): good 2011-09-20 17:20:39
你的测得A562的值应该算正常的，看你标准品配的浓度范围的，我们最高浓度为2000ug/mL的，在37摄氏度孵育半个小时测得吸光度有1.7以上。你师姐是不是没孵育那么长时间啊，这样测出来的吸光度值都会偏小的。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-09-20 08:41:39
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

girlfisher

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
athenawj(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): good 2011-09-20 17:20:51
你的标准曲线配错了1个数量级
Pierce BCA法的线性范围在5-250ug/ml
另外，吸光值超过1就不准了
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-09-20 11:20:58
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

athenawj

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by girlfisher at 2011-09-20 11:20:58:
你的标准曲线配错了1个数量级
Pierce BCA法的线性范围在5-250ug/ml
另外，吸光值超过1就不准了

按照说明书配的呀，虽然说吸光度最好控制在0.8以内，线性度好些
赞一下 回复此楼
6楼2011-09-20 14:19:37
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

girlfisher

金虫 (小有名气)
你用的是microplate reader还是分光光度计呢？
如果分光光度计的话值会比较大，而且你配的是说明书的后半段，线性度肯定不如前半段好
赞一下 回复此楼
7楼2011-09-20 14:31:08
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

imfly77

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
athenawj(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): good 2011-09-20 17:21:17
按说明书配，没问题的。
测试时蛋白质样品需要进行稀释。
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2011-09-20 14:52:59
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

imfly77

木虫 (小有名气)
另外，BCA法的标准曲线不是直线，如果用直线拟合误差会比较大，建议你用多次曲线拟合。
赞一下 回复此楼
9楼2011-09-20 14:55:23
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

athenawj

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by girlfisher at 2011-09-20 14:31:08:
你用的是microplate reader还是分光光度计呢？
如果分光光度计的话值会比较大，而且你配的是说明书的后半段，线性度肯定不如前半段好

分光光度仪测得，我重复一下试试吧
赞一下 回复此楼
10楼2011-09-20 15:04:52
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

athenawj

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by athenawj at 2011-09-20 15:04:52:
分光光度仪测得，我重复一下试试吧

今天重复了一下，值还是没有减少一个数量级，我把提取的蛋白测了一下，依照标准曲线浓度可以达到1.8mg/ml
赞一下 回复此楼
11楼2011-09-20 18:51:52
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

i羽翼深蓝i

新虫 (正式写手)
★
athenawj(金币+1): 谢谢参与
我的吸光度都在0.1左右，有关系么
赞一下 回复此楼
12楼2019-06-20 14:13:59
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)
★
athenawj(金币+1): 谢谢参与
没什么问题呀，不知道你想问什么，这很正常啊！！！！！你师姐是否做了稀释呢？但是你做的一点问题都没有。
赞一下 回复此楼
13楼2019-06-20 15:56:37
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 athenawj 的主题更新
131/1返回列表
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴，则可能无法领取此贴金币
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件) SCI英文润色翻译-EnPapers美团队-先修改后付款
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 发现督导在听课，需要跟TA招呼示意吗？有同学看手机、课件有疏漏算大问题吗？ +11 河西夜郎 2024-04-19 11/550 2024-04-23 15:01 by mylifecg
[考博] 申博成果界定是根据Jcr分区还是中科院分区 +4 我属驴核动力驴 2024-04-22 4/200 2024-04-23 12:18 by lyfbangong
[教师之家] 找工作过程中碰到好多人问南京某新换校长211的政策，规定如下 +14 ZHONGWU_U 2024-04-21 16/800 2024-04-23 10:41 by Quakerbird
[考研] 0854－0855调剂 +4 shangannum1 2024-04-21 7/350 2024-04-23 09:46 by alkb
[论文投稿] Chemical Engineering Journal投稿3周了，一直显示With editor状态。这是送审了吗？ 10+3 yifeng11 2024-04-20 7/350 2024-04-23 09:29 by bobvan
[博后之家] 南京大学-广州大学联合招聘博士后 欢迎广大优秀人才！！！ +3 黑魔变身啾 2024-04-20 6/300 2024-04-23 08:01 by dodonaomi
[硕博家园] 考研，求职还是考编? +9 xizj 2024-04-21 17/850 2024-04-23 06:38 by lizhiweiouc
[论文投稿] 国家重点研发计划论文可以发MDPI里的期刊吗 +6 lin_2018 2024-04-17 6/300 2024-04-22 17:32 by 20094958
[基金申请] 下雨了 +15 zju2000 2024-04-16 22/1100 2024-04-22 16:03 by newfuzzy1
[考博] 25申博记录贴 +6 我属驴核动力驴 2024-04-18 12/600 2024-04-22 15:50 by 诩雾
[公派出国] 東京大学 应用化学专业柳田研究室 招收修士/博士生 +4 蝶梦123 2024-04-19 4/200 2024-04-22 15:10 by liukang88j
[访问学者] CSC的访问学者申请，没有个评审意见，也不知道怎么改，还有必要申请吗 +3 flyingship 2024-04-20 3/150 2024-04-22 13:52 by louistom_521
[找工作] 化工专业 10+3 xiao太阳94 2024-04-18 7/350 2024-04-22 13:48 by mlnjut
[考研] 问题已经解决。 +13 lekinna 2024-04-19 30/1500 2024-04-22 13:09 by 矛dei到
[找工作] 工作问题求助 +3 向前?@ 2024-04-18 4/200 2024-04-22 09:40 by zhaojiang427
[论文投稿] 编辑是选国外的好还是国内的好。 +8 lizhengke06 2024-04-20 8/400 2024-04-22 08:58 by cuiyunjian
[硕博家园] 材料工程，二本硕士，值得读吗 +3 简风23 2024-04-20 6/300 2024-04-21 12:19 by 简风23
[基金申请] 估计今年青基又没戏 +11 忆念7 2024-04-18 11/550 2024-04-20 17:29 by mygod_nju
[考研] 考研英语带学 +6 choice666 2024-04-18 6/300 2024-04-19 17:46 by charles-c
[论文投稿] 投稿求助 5+3 我是洲洲啊 2024-04-17 5/250 2024-04-18 17:13 by topedit
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭