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高悬赏 速度解释拉曼光谱 高手进
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生物模板上组装了金纳米粒子，审稿意见是让补测个拉曼 证明一下金粒子确实是在生物模板上。于是做了拉曼。 在514nm下进行的拉曼 基本上没有峰，而且基线飘移的很凶。怀疑是被荧光干扰，所以换作1064nm做了傅立叶拉曼，就是上传的这个图了。 金纳米粒子的直径在10-20nm之间。 生物分子作为对照 做了个拉曼 还不错， 然后做了一个在生物分子上附着了纳米金粒子的样品的拉曼光谱，峰基本上都没了，这是怎么回事啊？第一次做拉曼，请高手指教，应该怎么做呢？或者应该怎么分析呢？ 图如下：（红色的是生物分子本身，黑色的是附着脸纳米金粒子的拉曼）  [ Last edited by longer1373 on 2011-7-6 at 20:41 ] |
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 拉曼光谱 | 拉曼 |
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【答案】应助回帖
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如果我理解正确的话，审稿人的意见是让你采用SERS的方法来证明你的纳米粒子在生物模板上面。也就是说，吸附了纳米金粒子之后得到的Raman光谱要比你由单纯的生物模板的得到的拉曼要强。这个就是说，吸附了金纳米粒子之后的生物模板的Raman峰的强度要强于没有吸附金纳米粒子的生物模板的Raman峰。 从你的光谱里面，只是看出了Raman的counts确实增强了很多，但是没有观测到你的生物模板的信息。是不是你的激光功率太高了？要不就是你的纳米粒子太多了，以至于完全盖住了你的生物模板。另外，你有没有测量一下UV-vis？你的纳米粒子的吸收峰在多少nm？然后根据这个选择一下别的波长的激光。祝你好运！ |
5楼2011-07-08 15:06:13
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原则上可以，但最好是633，785没有共振，估计测得不好，但可以试试. 这是因为金的表面等离子体振动可以和633的激发光产生共振，这样才能产生最大的电磁场增强，从而使吸附于其上的分子拉曼信号得到增强，并且相对于本体信号有一定的吸收峰位置或强度的变化或新吸收峰的出现。而这些现象只有当分子化学或物理吸附于金属表面时才会出现，（主要是金或银，当然也可以是过渡金属。但只有金或银最好。但对于生物分子，由于银会影响其活性，故一般选金）。所以审稿人要求你测增强拉曼来证明分子和金属是连接上了，因为这是一个比较直接的方法。如果你的生物分子够大，我觉得AFM应该也行吧，只要和本体不同，并且本体上有的峰在你的增强光谱上都有，再来点新的峰，或来点峰增强就差不多了。至于归属就得找文献，如果你的没人做过，就有点麻烦了。 |
16楼2011-07-10 22:15:05
pinguo
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【答案】应助回帖
longer1373(金币+20): 非常感谢解答，实验将在下周重复，会继续更新实验进展，期待有好消息，谢谢！ 2011-07-08 21:58:32
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不过有几个问题，请您赐教： 1.SERS一般不是都需要探针分子的吗？就是一些大的有机分子。不是任何有机物都可以作为SERS的探针分子的吧？ 你说得对，是需要探针分子，但是我个人认为，那是为了证明SERS的存在。比如说可以增强多少倍。使用很灵敏的探针分子， 很稀的浓度。我觉得你的生物分子也可以作为探针分子，只不过就是增强倍数的问题。 2.测试紫外可见的吸收峰位置在530nm左右，首次做拉曼选择的激光波长为514.5nm，但是非常悲哀的没有任何信息，初步怀疑是荧光所致。图上传如下。 看见了，是荧光很强。 3.1064nm下测试的功率为0.12W，不算太大了吧，装了两次样，结果都如此。 这个已经不小了。通常用的是几个mW，你这都已经120mW了。样品估计被烧焦了！不过我不清楚这个波长的激光是不是很大，没有使用过。我使用514和635的激光的时候，都是几个mW，有的时候是0点几个mW。 4.还有一个问题想请教：在1064nm下重复实验，液体样品（严格来说是悬浊液）应该怎么制样呢？ 直接测量应该就可以吧，找一个玻璃管装完液体之后封闭，直接测量就行了。或者不用那么麻烦，把溶液装载烧杯或者表面皿里面，使用10x的镜头，不要让镜头接触到液面。 |
9楼2011-07-08 18:18:00
longer1373
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让人吐血的拉曼2楼2011-07-07 09:35:24
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3楼2011-07-07 22:14:40
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4楼2011-07-08 10:55:28
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