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sunnybear

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】细胞实验中蛋白药物的处理方法

我想做一个MTT细胞实验，我用的药物是蛋白质。我想问一下我的蛋白应该怎么进行除菌处理，用滤器会不会对蛋白有影响，蛋白的损失量大吗，滤膜的孔径应该怎么选择，要是不过滤对细胞会不会有影响？初次做细胞实验，请教大家！谢谢回复！
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1楼2010-07-30 18:46:35
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yukarale

铜虫 (初入文坛)
★
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-08-13 18:44:06
sunnybear(金币+1):非常感谢！ 2010-08-15 21:36:20
我一般用0.22滤膜过滤，不过滤的话有可能会染菌，但也有不染菌的可能，过滤一下会比较好
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2楼2010-08-11 14:23:36
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皖山潜凤

银虫 (小有名气)
★
lstt09nk(金币+1):欢迎补充~~ 2010-08-13 18:44:31
sunnybear(金币+2):谢谢回复！ 2010-08-15 21:36:41
sunnybear(金币+2):谢谢回复！ 2010-08-15 21:37:00
引用回帖:
Originally posted by sunnybear at 2010-07-30 18:46:35:
我想做一个MTT细胞实验，我用的药物是蛋白质。我想问一下我的蛋白应该怎么进行除菌处理，用滤器会不会对蛋白有影响，蛋白的损失量大吗，滤膜的孔径应该怎么选择，要是不过滤对细胞会不会有影响？初次做细胞实验， ...

直接过滤。0.22um，要是不放心的话，过滤前先放在-80度冷冻一下，然后过滤。一般过滤一下绝对没问题的，细菌绝对被挡住的
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3楼2010-08-13 12:57:30
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henkally

禁虫 (著名写手)
sunnybear(金币+1):谢谢您的建议 2010-08-15 21:37:50
本帖内容被屏蔽
4楼2010-08-13 13:51:23
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梧桐如雪

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+5):鼓励新虫交流~~回答的很详细，赞~~ 2010-08-13 18:46:22
sunnybear(金币+2):感谢您分享实验经验 2010-08-15 21:38:22
millipore有好几种膜的一次性滤器，我买的是那种黄色的那种，PVDF膜的，0.22um，是最低蛋白吸附量的。你可以上他们网站看下。比较经济实惠的一个选择，还有个0.11um的，可以除支原体了，可惜比较贵。肯定要损失一点体积，滤器中会有残留，但浓度基本没啥影响。我也是做蛋白药物的活性检测的，MTT做得太多了。祝楼主成功。
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5楼2010-08-13 15:11:19
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